HPV関連癌細胞におけるp53癌抑制遺伝子の発現と機能におよぼすCdtの効果

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13671962
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 大和 建嗣 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 講師 (50174751)
• 研究分担者: 西原 達次 九州歯科大学, 歯学部, 教授 (80192251)
• キーワード: Cdt / HPV / E6 / E7 / p53 / p21

研究概要

Cdt(cytolethal distenslon toxin)は,赤痢菌やカンピロパクターなどの腸炎原因菌や歯周病菌であるActinobacillus actinomycetemcornitans(Aa)によって産生される毒素であるが,様々な哺乳類細胞に対して細胞死とともに細胞周期G2期停止を誘導することが知られているが,その分子メカニズムはまだ明らかにされていない。ヒトパピローマウイルス16型(HPV-16)および18型(HPV-18)は,肛門生殖器癌と一部の口腔咽頭癌の発症に深く関与する癌原性ウイルスである。これらのウイルスの有するE7癌遺伝子産物は,網膜芽細胞腫関連遺伝子産物(Rb)に直接結合して,Rbの増殖抑制機能を阻害するとともに,もう一つの癌遺伝子産物であるE6を介して,p53遺伝子産物を分解・不活化を引き起こす。これらの癌抑制遺伝子産物の不活化は,宿主細胞を異常増殖能する癌細胞に変えてしまう。我々は,HPV-18関連癌細胞株であるHeLa胎細胞においてAa由来のCdtが,G2期停止と共に,p53とp21^<CIP1/WAF1>(p21)発現レベルを著しく上昇させることを国内外で初めて見い出した。
本年度の研究で、野生型p53遺伝子を有するマウスHS-72細胞にHPV-16のE6/E7遺伝子を発現させ、recombinant Aa CdtによるG2期停止とp21発現誘導においてp53がどのような役割を果たしているかを解析した。E6/E7発現HS-72細胞において、Cdtは、p53レベルの増加を伴うことなくG2期停止とp21発現誘導を引き起こした。さらに、ドミナントネガティブp53変異体を発現させたHS-72においても、G2期停止とp21レベルの増加が見られた。以上から、HS-72細胞におけるCdtによるp21発現誘導とG2期停止は、p53非依存性であると考えられた。現在、HeLa細胞とE6/E7発現HS-72におけるCdtに対するp53反応性の違いについて解析中である。

研究成果

• [文献書誌] Sato, T. et al.: "p53-independent exprossion of p21^<CIPI/WAF1> in plasmacytic cells during G2 cell cycle arrest induced by Actinobacillus actinomy cetemcomitans cytolethal distending toxin"Infect, Immun.. 70. 528-534 (2002)
• [文献書誌] Yamato, K. et al.: "Activation of the p21^<CIP1/WAF1> promoter by bone morphogenetic protein-2 in mouse B lineage cells"Oncogene. 20. 4383-4392 (2001)
• [文献書誌] Koseki, T. et al.: "Role of TGF-β family in ostepclatogencsis induced by RANKL"Cell Signal.. 14. 31-36 (2002)
• [文献書誌] Muto, A. et al.: "A novel differentiation-inducing therapy for acute promyelocytic liukemia with a combination of arsenic trioxide and GM-CSF"Leukemia. 15. 528-534 (2001)
• [文献書誌] Fukuchi, Y. et al.: "Mcl-1, an early-induction molecule, modulates activin A-induced apoptosis and differentiation of CML"Oncogene. 20. 704-713 (2001)
• [文献書誌] Okahashi, N. et al.: "Osteoclast differentiation is associated with transient upregulation of cyclin-dependent kinase inhibitors p21^<WAF1/CIP1> and p27^<KIP1>"J.Cell.Biochem.. 80. 339-345 (2001)
• [文献書誌] Hashimoto, S. et al.: "Intracellular apoptosis-inducing factor is induced by a type H^+-ATP ase inhibitor in B lineago cells"J.Cell.Physionl.. 186. 65-72 (2001)