| 研究課題/領域番号 |
13671975
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| 研究機関 | 岩手医科大学 |
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研究代表者 |
城 茂治 岩手医科大学, 歯学部, 教授 (20154411)
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| 研究分担者 |
佐藤 健一 岩手医科大学, 歯学部, 講師 (90265174)
佐藤 雅仁 岩手医科大学, 歯学部, 助教授 (60215845)
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| キーワード | 上頸神経節 / リアルタイム共焦点レーザー顕微鏡 / 細胞内カルシウムイオン濃度 |
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| 研究概要 |
生後8週齢、雄性ウィスター系ラット(250-400g)から上頸神経節を摘出し、コラゲナーゼによる結合組織の消化後、Ca^<2+>憾受性色素Indo-1/AMを4℃で12時間負荷した。その後に神経節標本を、カバーグラスが底面に張られた灌流チャンバーに固着した。標本周囲をHEPES緩衝リンゲル液で灌流し、ATPおよび各種の試薬を加えた際の[Ca^<2+>]iの変化を、リアルタイム共焦点レーザー顕微鏡(Nikon RCM/Ab)を用いて解析した。
上頸神経節の神経細胞(neuron)と衛星細胞(satellite cell)両者においてATPによるCa^<2+>応答が認められた。Ca^<2+>上昇は、最初にsatellite cellで起こり、引き続いてneuronで起った。Suramin(P2 receptor抑制薬)で前処置することによりATPで誘発されるCa^<2+>応答は抑制された。Satellite cellではP2X receptorの作用薬であるα.βmethylene ATPでCa^<2+>応答がみられ、一方neuronではP2Y receptorの作用薬であるUTPでCa^<2+>応答が引き起こされた。灌流液からCa^<2+>を除去すると、satellite cellのCa^<2+>応答は抑制され、Reactive blue 2(P2Y receptorの抑制薬)は、neuronのCa^<2+>応答を抑えた。よってCa^<2+>応答を引き起こす受容体は、neuronでは、P2Y、satellite cellでは、P2X receptorであった。
今後は局所麻酔薬を作用させた時の反応を明らかにしていく予定である。
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