| 研究課題/領域番号 |
13672314
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| 研究機関 | 摂南大学 |
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研究代表者 |
前田 定秋 摂南大学, 薬学部, 教授 (00135732)
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| 研究分担者 |
山室 晶子 摂南大学, 薬学部, 助手 (20340862)
吉岡 靖啓 摂南大学, 薬学部, 助手 (40330360)
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| キーワード | 一酸化窒素 / アポトーシス / サイクリックGMP / チトクロームC / RAW264細胞 / プロテインキナーゼG / Bax |
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| 研究概要 |
マクロファージ様細胞RAW264を用いた実験において、高濃度NOにより誘発される細胞死は、低濃度NOの前処置により抑制された。この低濃度NOの細胞死保護作用は、グアニル酸シクラーゼ阻害剤のLY83583あるいはODQにより阻害され、また、dibutyryl-cGMPの前処置によっても高濃度SNP誘発細胞死は抑制された。このcGMP前処置による細胞死保護効果は、SNP以外のNO発生剤によってもみられたことからもNO誘発細胞死に対して低濃度NOが抑制作用を持つことが明らかとなった。高濃度NOによるアポトーシス誘導時において生じるミトコンドリアからのcytochrome c遊離を低濃度NOおよびdibutyryl-cGMPが著明に抑制したことから、低濃度NOは、cGMPの産生を介してcytochrome c遊離を抑制することにより細胞死保護作用を発揮していることが示唆された。また、低濃度NOの細胞死保護作用は、プロテインキナーゼG(PKG)阻害剤のKT5623によって抑制されたことから、cGMPの作用はPKGの活性化を介することが示唆された。高濃度NOによるcytochrome c遊離は、細胞質に存在するアポトーシス誘発因子のBaxのミトコンドリアへの移行により引き起こされることを明らかにし、この移行を低濃度NOがcGMPを介して阻害することを明らかにした。これらの結果より、PKGの活性化がNOにより誘導される細胞死を阻止することが考えられたので、活性型PKG遺伝子を細胞内に導入してPKGを安定発現させた細胞を作成し、NOによる細胞死に対して抵抗性を獲得しているか否かについて検討を加えている。また、PKGの活性化からcytochrome c遊離抑制に至る機構についても検討を行っている。
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