| 研究概要 |
[研究の目的]
本研究の最終目標は,これまで知られていないヒトタンパク質中の抗高血圧作用ペプチドにスポットを当て,高血圧症の予防もしくは治療に利用できるツールを創製することである。ヒトタンパク質のアミノ酸配列中には,多くの未知活性ペプチドが含まれている。これらは,タンパク質中では単なる配列の一部であるが,遊離されたペプチドとなることで初めて活性を示すため,潜在性の活性ペプチド群としてその解明と応用が期待されている。本研究では,これらの未知活性ペプチドに着目し新規なアンジオテンシン変換酵素阻害ペプチドを発見し,そのtransition-states analoguesからデザインされるレトロインバルソ型の阻害ペプチドアナログを創製することで新たな医薬品素材を提供する。
[研究の成果]
新規ACE阻害ペプチドの探索,分離精製,機能解析
1.各種のヒトタンパク質をプロテアーゼ分解し,生成するACE阻害活性を測定したところ,γグロブリンタンパク質のパパイン分解物に強いACE阻害活性が表れた。
2.逆相高速液体クロマトグラフィー手法を駆使してACE阻害ペプチドを分離法精製し,2種類のACE阻害ペプチドを単離した。
3.得られたペプチドについてアミノ酸分析,アミノ酸配列分析,MS分析を行った結果,それぞれVal-Ala-Trp(VAW)およびVal-Ser-Trp(VSW)のアミノ酸配列をもつトリペプチドであることが明らかとなった。これら新規な配列のACE阻害ペプチドである。
4.どちらのペプチドも阻害の機構は競合阻害を示し,50%阻害活性値は,VAWが4.3μM, VSWが13μMであった。
また,ヒト血漿のサーモライシン分解物中からは,4種類の新規なカテプシンB阻害ペプチド(Cabin-1, 2, 3, 4)を単離した。
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