血液脳関門Tight Junction形成に関わる周皮細胞特異的遺伝子の探索

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13672397
• 研究機関: 共立薬科大学
• 研究代表者: 中島 恵美 共立薬科大学, 薬学部, 教授 (90115254)
• 研究分担者: 井澤 美苗 共立薬科大学, 薬学部, 助手 (10338006) ; 飯笹 久 共立薬科大学, 薬学部, 助手 (80306662)
• キーワード: SV-40TG-RAT / Tight Junction / TR-BME / TR-PCT / 血液脳関門 / 骨髄由来血管内皮細胞株 / 特異的遺伝子 / 脳血管周皮細胞株

研究概要

これまでに、条件的不死化遺伝子導入ラット(Tg-rat)から、世界初の脳毛細血管由来周皮細胞株(TR-PCT)を樹立することに成功し、この細胞が多機能性であることを証明した(Asashima T.Iizasa H.Terasaki T. Nakashima E, Eur.J.Cell.Biol., 81,145,2002)。また、血管透過性を調節する因子として知られるAngiopoietin-1(Ang-1)を、ラットより初めてクローニングし、これを高濃度に発現する昆虫細胞系を確立した。この実験系を用いて、我々が既にTg-ratから樹立している骨髄由来血管内皮細胞株(TR-BME)への効果を検討したととろ、Tight Junctionを構築する蛋白の発現を上げることがわかった(Iizasa H.Bae S-H.Asashima T.Kitano T.Matsunaga N.Terasaki T.Kang Y-S.Nakashima E.Pharmaceut.Res.,19,1757,2002)。更に、一連のTR-PCTの細胞株を樹立し、高血圧や加齢に関連するmRNAを発現していることを確認し、これまでに報告されていなかった周皮細胞の遊走活性や、TGF-βへの応答性など、新規な特徴を次々と発見し、周皮細胞が、多機能であることを証明した(Asashima T, Iizasa H, Terasaki T, and Nakashima E, J Cellular Physiol, in press,2003)。

研究成果

• [文献書誌] Asashima T., Iizasa H., Terasaki T., Nakashima E.: "Newly developed rat brain pericyte cell line, TR-PCT1, responds to transforming growth factor-β and β-glycerophospate"Eur.J.Cell.Biol. 81. 145-152 (2002)
• [文献書誌] Iizasa H., Bae S-H., Asashima T., Kitano T., Matsunaga N., Terasaki T., Kang Y-S., Nakashima E.: "Augmented expression of the tight junction protein occuludin in brain endothelial cell line TR-BBB by rat angiopoietin-1 expressed in baculovirus-infected Sf plus insect cells"Pharmaceut.Res. 19. 1758-1761 (2002)
• [文献書誌] Asashima T, Iizasa H, Terasaki T, Nakashima E: "Rat brain pericyte cell lines expressing β2-adrenergic receptor, angiotensin II receptor type1A, klotho, and CXCR4 mRNA despite having endothelial cell markers"J Cellular Physiol. (in press). (2003)