2001 年度実績報告書

Ras、RhoファミリーGTPaseネットワークの制御機構

研究課題

研究課題/領域番号	13680713
研究機関	神戸大学
研究代表者	佐藤孝哉神戸大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (20251655)
キーワード	GEF / Db1ファミリー / GTP結合蛋白質 / Rhoファミリー / Cdc42 / ACK-1 / PLCε / RA-GEF
研究概要	RhoファミリーGTP結合蛋白質に対するグアニンヌクレオチド交換因子(GEF)であるDb1ファミリー蛋白質は、細胞骨格系の再構成など、種々の細胞機能を調節している。本研究課題では、上流からの刺激に応答したDb1によるRhoファミリーの活性調節機構を解析した。Db1は、Cdc42の標的分子であるACK-1チロシンキナーゼによりリン酸化され、その結果、RhoA、Rac1、Cdc42に対するGEF活性が上昇することが知られている。一方ACK-1は、アダプター分子Grb2を介して上皮成長因子レセプター(EGF-R)と会合するので、EGF-Rの下流でのDb1の機能を検討した。その結果、EGF刺激によって、ACK-1とDb1のチロシンリン酸化が誘導され、その際、EGF-Rの下流でCdc42、Grb2が関与することが明らかとなった。これに伴って、Db1が活性化され、RhoA、Rac1、Cdc42を介して、アクチン細胞骨格系の再構成が誘導された。以上の結果より、チロシンリン酸化によるDb1の活性調節が、EGF-Rの下流で実際に機能していることが強く示唆された。一方、Db1の近縁分子には、多くのスプライスバリアントが存在することも明らかとなった。現在、活性調節に関与すると考えられるドメインの機能を検討しており、今後それらの特異的な生理機能を明らかにしていく予定である。一方、Rasファミリーに関しては、まずRasあるいはRap1の標的分子として機能するPLCεのRap1 GEFドメインが、ゴルジ装置におけるRap1の下流での持続的活性化に必要であることが示唆された。また、他のRap1 GEFであるRA-GEF-1とRA-GEF-2は、それぞれ、Rap1、M-Rasの下流で、ゴルジ装置あるいは細胞膜に存在するRap1を介するシグナル伝達系の増強に関与していることを示した。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Kido, M.: "Critical function of the Ras-associating domain as a primary Ras-binding site for regulation of Saccharomyces cerevisiae adenylyl cyclase"J. Biol. Chem.. 277・5. 3117-3123 (2002)
[文献書誌] Gao, X.: "Identification and characterization of RA-GEF-2, a Rap guanine nucleotide exchange factor that serves as a downstream target of M-Ras"J. Biol. Chem.. 276・45. 42219-42225 (2001)
[文献書誌] Jin T.: "Role of the CDC25 homology domain of phospholipase Cε in amplification of Rap1-dependent signaling"J. Biol. Chem.. 276・32. 30301-30307 (2001)
[文献書誌] Liao, Y.: "RA-GEF-1, a guanine nucleotide exchange factor for Rap1, is activated by translocation induced by association with Rap1・GTP and enhances Rap1-dependent B-Raf activation"J. Biol. Chem.. 276・30. 28478-28483 (2001)
[文献書誌] Kato-Stankiewicz, J.: "Epidermal growth factor stimulation of the ACK1/Dbl pathway in a Cdc42 and Grb2-dependent manner"Biochem. Biophys. Res. commun. 284・2. 470-477 (2001)
[文献書誌] Song, C.: "Regulation of a novel human phospholipase C, PLCε, through membrane targeting by Ras"J. Biol. Chem.. 276・4. 2752-2757 (2001)

2001 年度 実績報告書

Ras、RhoファミリーGTPaseネットワークの制御機構

研究代表者

佐藤 孝哉 神戸大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (20251655)

研究成果

[文献書誌] Kido, M.: "Critical function of the Ras-associating domain as a primary Ras-binding site for regulation of Saccharomyces cerevisiae adenylyl cyclase"J. Biol. Chem.. 277・5. 3117-3123 (2002)

[文献書誌] Gao, X.: "Identification and characterization of RA-GEF-2, a Rap guanine nucleotide exchange factor that serves as a downstream target of M-Ras"J. Biol. Chem.. 276・45. 42219-42225 (2001)

[文献書誌] Jin T.: "Role of the CDC25 homology domain of phospholipase Cε in amplification of Rap1-dependent signaling"J. Biol. Chem.. 276・32. 30301-30307 (2001)

[文献書誌] Liao, Y.: "RA-GEF-1, a guanine nucleotide exchange factor for Rap1, is activated by translocation induced by association with Rap1・GTP and enhances Rap1-dependent B-Raf activation"J. Biol. Chem.. 276・30. 28478-28483 (2001)

[文献書誌] Kato-Stankiewicz, J.: "Epidermal growth factor stimulation of the ACK1/Dbl pathway in a Cdc42 and Grb2-dependent manner"Biochem. Biophys. Res. commun. 284・2. 470-477 (2001)

[文献書誌] Song, C.: "Regulation of a novel human phospholipase C, PLCε, through membrane targeting by Ras"J. Biol. Chem.. 276・4. 2752-2757 (2001)

2001 年度実績報告書

佐藤孝哉神戸大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (20251655)