| 研究概要 |
我々は、B細胞抗原受容体(BCR)より発するシグナル伝達をチロシン脱リン酸化酵素CD45がどのように制御しているかを解析している。特に本研究では、細胞膜Raft構造におけるBCRとCD45の制御関係について解析を行った。この結果、CD45が極めてユニークな形でBCRシグナル開始機構に関与することを示唆する結果が得られつつある。
(1)Raftにおけるシグナル伝達分子の挙動
未熟B細胞株WEHI-231を用いてシグナル伝達分子のBCR刺激前後におけるRaftへの会合を解析した。この結果、src-family kinaseであるLynは刺激以前からRaftに存在し、刺激によりわずかに増加した。一方、BCRの本体であるs-lgMおよびlg-α,lg-βは刺激後1分以内にRaft画分に集積した。
(2)CD45の経時的な動態解析
CD45は、刺激以前から一部がRaft画分に存在していた。興味深いことに、CD45はBCR刺激に伴い、一過的にBCRが存在するRaft画分から解離した。この結果は、WEHI-231、のみならずマウスB細胞においても観察された。
(3)BCR刺激前後におけるRaft内外のPTK活性の比較とCD45の作用点解析
さらに、詳細な解析のため、CD45欠失WEHI-231クローン(以前我々が樹立した細胞株)およびCD45KOマウス脾細胞由来のB細胞を用いて実験を行った。Lyn活性をBCR刺激前後のRaft画分において確認したところ、CD45欠失細胞ではいずれも明かなLynの活性亢進を認めた。
以上の結果は、RaftにおけるCD45の役割がLynの活性抑制であり、さらにCD45の解離がBCRシグナルのLyn活性を点火するする事を示唆している。現在、このメカニズムについて詳細な解析を行っている。
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