| 研究概要 |
酵母におけるヒトch-TOG相同タンパク質Dis1ならびにMtc1について以下の解析を行なった。まずDis1-GFP融合タンパク質の解析からDis1は分裂期中期から後期にかけての極めて短い時期に動原体に局在することを見出した。さらに解析を進め、Dis1は微小管結合タンパク質であると同時に、分裂期特異的に動原体DNAの中央領域に結合するタンパク質であることが明らかとなった。
次に我々はゲノムデータベースを検索し、分裂酵母にもう一つこのファミリーに属するタンパク質Mtc1を同定し、解析を行なった。Mtc1もDis1と同様に微小管と結合することを示し、Mtc1破壊株では許容温度においても細胞質微小管がほとんど消失していることを見出した。一方Dis1については変異株ならびに遺伝子破壊株で間期の細胞質微小管には異常が見られないことから同じ遺伝子ファミリーに属する遺伝子でありながら機能が多様化していると考えられる。
これらの遺伝子産物と相互作用する因子の探索を主として行なった。まずDis1を用いて酵母ツー・ハイブリッド法により、Dis1自身とMal3を同定した。EB1,Mal3共に微小管結合活性を持ち、細胞内で微小管と共局在することが知られている。Dis1は自分自身、ならびにMal3と結合することで微小管機能を制御する因子かもしれない。また、Dis1,Mal3共にヒト相同遺伝子とアミノ酸の高度な保存性を保持していることから、この物理的相互作用ならびにそれら複合体の機能も種間を通じて保存された機構によるものかも知れない。
本研究の一連の解析の結果により、進化的に高度に保存された分裂酵母の2つの微小管結合タンパク質Dis1,Mtc1は、各々独立した機能制御を受けながら、微小管を介した細胞周期制御、とりわけ分裂期における微小管機能、並びに動原体機能に必須機能を持つことが明らかとなった。
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