小胞体では多くの膜タンパク質や分泌タンパク質が生合成される。小胞体には品質管理機構と呼ばれる機序があって、正しい高次構造をもったタンパク質のみが分泌経路にのり、一方でミスフォールドしたタンパク質は小胞体にとどめられて、小胞体関連分解(ERAD)によって細胞内分解を受ける。私たちは、マウスの新規遺伝子EDEMをクローニングして、糖タンパク質のERADを促進する機能をもつことを報告した。本研究では引き続いてEDEMタンパク質の機能解析を行い、以下のことを明らかにした。 1.糖タンパク質がERADによって分解される場合には、N型糖鎖のマンノースのトリミングが分解のシグナルになっている事が知られている。私たちは、ER ManIを細胞にトランスフェクトすると、ミスフォールドした糖蛋白質のERADが促進されることを明らかにした。ER ManIは分解のシグナルとなるMan8Bフォームの糖鎖産生を促進し、一方EDEMはMan8Bフォームの分解シグナルを認識して、基質蛋白質を分解系へともっていく働きをしている可能性が示唆された。 2.私達はERADのモデル基質として、小胞体内でミスフォールドするα1-アンチトリプシンのNHK亜型を用いて実験している。NHKはC末端近傍にCys残基をひとつもつので、ジスルフィド結合を形成してダイマーを作る可能性がある。私達は、NHKが小胞体内で実際にダイマーを形成すること、EDEMを共発現させるとこのダイマー形成が阻害されることを見いだした。ミスフォールドしたタンパク質がダイマーを形成すると、細胞質への逆行輸送の効率が悪くなると予想される。一方でEDEMは、正常型のα1-アンチトリプシンの分泌や分解には影響を及ぼさなかった。これらの結果から、EDEMはミスフォールドした糖タンパク質を認識して結合し、分解可能な状態に保つ、シャペロン様の機能をもつのではないかと考えている。
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