研究概要 |
シナプス後部にmRNAが局在する遺伝子(Dem遺伝子)を網羅的に同定しようとするプロジェクトにおいて発見した新規の遺伝子について,完全長のcDNAのクローニングとそれらの性質,および機能解析を進めた.いくつかの新規完全長遺伝子をクローニングし遺伝子登録を行った.新規遺伝子について以下の事を明らかにした。 (1)SynUSP:脱ユビキチン酵素活性を証明した。またtwo hybrid法により,選択的に相互作用するタンパク質を同定した。何度かのトライののち,良質の抗体を作成することができた。 (2)synArfGEF:特異抗体を持ちい,タンパク質の発現部位をラット脳で明らかにした。 (3)ssLRP:外国との共同研究であるが,ligandを同定するための道具として,LRP null cellへのssLRP stable stransformantの作成を試みたが,合成されたssLRはtrans Golgiでトラップされて細胞膜にうまく組み込まれなかった。引き続き別の方法でligandを同定する計画を進めている。 (4)他のDemで,PSDのscaffold proteinとしての機能が考えられるTANCとp55Lの完全長遺伝子をクローニングし,Pull-down法により,結合タンパク質を同定した。引き続き,免疫共沈法などを用いて結合タンパク質を明らかにする計画である。両タンパク質ともに,抗体を作成した。 synUSPとssLRPについては,ノックアウトマウスを作成して,さらに生理機能,病態との関連を明らかにすべく計画している。
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