SMXARI系統群を用いたウレタン誘発肺腫瘍感受性に関与する遺伝子の解析

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13680911
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 西村 正彦 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (20073661)
• 研究分担者: 大野 民生 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (90293620) ; 日合 弘 京都大学, 大学院・医学研究科, 教授 (10073131)
• キーワード: マウス / 肺腫瘍抵抗性遺伝子 / 肺腫瘍感受性遺伝子 / 遺伝子マッピング / リコンビナント近交系 / コンジェニック系 / コンソミック系

研究概要

(1)コンジェニック系およびコンソミック系作出による肺腫瘍抵抗性遺伝子Par3の第12染色体上での局在化とその同定(大野・西村)
肺腫瘍抵抗性遺伝子Part3を含むと考えられるSMXA24からのD12Mit52とD12Mit5で挟む領域をA/J系に導入したコンジェニック系(A.SMXA24-Par3^+)、と逆にA/J系の同領域をSMXA24系に導入したコンジェニック系(SMXA24.A-Par3^-)を育成した。それぞれのコンジェニック系マウスにウレタンを1ヶ月令で投与し、5ヶ月令で肺腫瘍数をカウントしたが、対照のA/J系とSMXA24系との間に差は見られなかった。一方、A/J系をベースに第12染色体のみがSM/Jに置換したコンソミック系(A.SM-Chr12)の育成に長年月を要し、ヘテロ接合体のマウスに1ヶ月令でウレタンを投与したが、肺腫瘍数のカウント時期である5ヶ月令に至っていない。
(2)未知の肺腫瘍感受性遣伝子の染色体マッピシグ(日合・大野・西村)
SMXA-8系統及びSMXA-24系統に未知の肺腫瘍感受性又は抵抗性遺伝子の存在が推定されるので、比較的感受性に属するSMXA-8系と強い抵抗性を示すSMXA24系の間で正逆交配を行い、合計386全個体について1ヶ月令でウレタンを投与し、5ヶ月令で肺表面の腫瘍数を実体顕微鏡下で観察し、腫瘍数の多い個体と少ない個体それぞれ40匹を選び、肝臓からDNAを抽出しPCR-SSLP(Simple Sequence Length Polymorphism)法により、SMXAの各RI系統の染色体領域の標識遺伝子構成を示すSDP(Strain Distribution Pattern)よりSMXA-8がSM/J由来でSMXA-24がA/J由来となっている領域をカバーする22種のマイクロサテライト(Mit)マーカーをタイピングした。遺伝子型と表現型の間の連鎖関係の有無を統計学的に検定したが、現在まで分離比の有意な隔たりが認められたマーカーは見い出されていない。

研究成果

• [文献書誌] Ohno T, Katoh J, Kikkawa Y, Yonekawa Y, Nishimura M.: "Improved strain distribution patterns of SMXA recombinant inbred strains by microsatellite markers"Exp.Anim.. 52(5). 415-417 (2003)
• [文献書誌] Anunciado RVP, Nishimura M, Mori M, Ishikawa A, Tanaka S, Horio F, Ohno T, Namikawa T.: "Quantitative trait locus analysis of serum insulin, triglyceride, total cholesterol and phospholipid levels in the (SM/J×A/J)F_2 mice"Exp.Anim.. 52(1). 37-42 (2003)
• [文献書誌] Kobayashi M, Ohno T, Tsuji A, Nishimura M, Horio F.: "Combinations of nondiabetic parental genomes elicit impaired glucose tolerance in mouse SMXA recombinant inbred strains"Diabetes. 52. 180-186 (2003)
• [文献書誌] Kobayashi M, Io F, Kawai T, Nishimura M, Ohno T, Horio F.: "SMXA-5 mouse as a diabetic model susceptible to feeding a high-fat diet"Biosci.Biotechnol.Biochem.. 68(1). 226-230 (2004)