| 研究概要 |
植物ホルモンの一つであるジベレリン(GA)はレタス種子の光発芽誘導で重要な役割を担っていると考えられている。すなわち,レタス種子においては赤色光による発芽誘導時に活性型GAであるGA_1の内生量が増加することが示されており,本研究ではその内生量の調節をGA生合成酵素遺伝子のプロモーター制御機構解明の観点から追究することを目的とし,それらプロモーター領域のDNAクローニングを試みることにした。GA3β-水酸化酵素(Ls3h1,Ls3h2),GA20-酸化酵素(Ls20ox1,Ls20ox2)をコードする遺伝子についてそれぞれプロモータークローニングを試みたが,Ls20ox2遺伝子のプロモーターについてinverse PCR法により単離することに成功した。この遺伝子は赤色光処理により発現量が減少することが示されているものである。単離した約3kbpの断片は,両端に制限酵素Hin dIIIサイトを有し,そこには,initiator,TATAbox,GCbox,CAATboxなどのコンセンサス配列がみられた。以前,我々がクローニングした当該遺伝子のcDNAの5'末端は,今回のinitiatorとほぼ一致し,ここからmRNAの合成(転写)がはじまるものと考えられた。それ以外のコンセンサス配列としては,GAREとGA-myb呼ばれるGA反応性シス配列がみられたが,解釈が困難であり,機能特定には至らなかった。その他の光反応性シス配列などについても検索したが,特筆すべきものはみられなかった。今後は,その他の遺伝子のプロモーターを単離するとともに,レポーター遺伝子などを用いてそれらプロモーターの機能解析を行う予定である。
|
