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(1)家族性筋萎縮性側索硬化症(ALS)の原因遺伝子の1つである変異スーパーオキシドジスムターゼ1(SOD1)による変異SOD1タンパクとの結合タンパクの探索することを目的として、同変異遺伝子トランスジェニックマウスの病巣部位(脊髄)と健常ヒト脊髄組織由来のcDNAライブラリーを構築しYeast two-hybridスクリーニングを行なった。その結果、トランスジェニックマウス脊髄由来のライブラリーより、神経分泌物質の一部に変異型SOD1に結合するが野生型とは結合しない物質を同定し、そのファミリーも同様の性質を示した。不死化細胞における免疫組織化学的検討によって、この物質は変異SOD1の一部をトランスゴルジネットワークに移動させる性質があることを突き止めた。変異SOD1による細胞死への影響については現在検討中である。ヒト脊髄由来のライブラリーからは数種類の未知物質、シャペロン物質を同定したが、動物細胞における免疫沈降実験では共沈されず、今後組織学的アプローチ、初代培養を用いたアプローチを計画中である。
(2)変異SOD1のタンパク化学的異常を検討する過程で、変異SOD1タンパクが細胞内一過性発現において、発現早期からユビキチン化され、さらに野生型に比べ溶解性が低下し、酸化ストレスによって多量体形成をすることを突き止めた。一過性発現マウス神経芽細胞腫のヒトSOD1恒常発現株を構築し、プロテアソームタンパク分解能を測定したところ、変異型が野生型に比べて低下していることを突き止め、胎仔マウス初代培養運動ニューロンがプロテアソーム抑制に選択的に脆弱であることを発見した
今後、変異SOD1タンパク特異的分解機構について、明らかにすべく検討中である。
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