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1.今回の実験・研究に先立ち、まずDNA等の核酸の取扱いを修得するために以下の手技を実際に行った。
1)プラスミドDNAを用いたサブクローエング、DNAの分離・精製。
2)cell lineを用いた基本的細胞培養手技の修得。
3)上記cell lineを用いたmRNAの抽出、PCRによるcDNA作成およびRT-PCR。
2.ヒトTGF-β1遺伝子(cDNA)の作成
TGF-β1 mRNAを発現していると報告されているcell lineを選びcDNAライブラリーを作成し、前もって作成しておいたDNAプローブを用いてスクリーニングを行い全長cDNAを獲得する。
全長cDNAをプラスミドに導入しシークエンサーでDNA配列を決定する。
以上を目的に、現在のところcDNAライブラリーを作成中である。
上記の他、ウイルスベクターの選定や、発現ベクターのデザインのため情報を収集している。
3.ウサギ(成熟家兎)大腿骨の関節軟骨に対する自家骨軟骨移植(Mosaicplasty)手技の確立。
上記試行錯誤の上、研究進行中である。
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