齲蝕、歯周病ワクチンの開発

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13771105
• 研究機関: 日本大学
• 研究代表者: 山本 正文 日本大学, 松戸歯学部, 助教授 (80210558)
• キーワード: コレラ毒素 / 易熱性毒素 / キメラ分子 / 粘膜アジュバント

研究概要

本研究ではコレラ毒素(CT)と毒素原性大腸菌の易熱性毒素(LT)のアジュバント誘導メカニズムの違いが何に起因するかを明らかにするために、CT-AサブユニットとLT-Bサブユニットのキメラ分子(CT-A/LT-B)およびLT-AサブユニットとCT-Bサブユニットのキメラ分子(LT-A/CT-B)を作製し、それぞれのアジュバント作用メカニズムを解析した。その結果、CTおよびLTはそれぞれのBサブユニットを介するシグナルによってIL-12レセプターの発現とそれに続くTヘルパーサイトカイン応答を制御していることが示唆された。そこで、無毒化変異型CT(mCT)E112KのAサブユニットとLT-Bサブユニットのキメラ分子(mCT-A/LT-B)を作製することにより、無毒であり、かつIgEの産生を抑えたアジュバントの開発を試みた。mCT-A/LT-BはADP-ribosyltranferase活性は検出されず、マウスの腸管を用いたileal loop試験においても下痢誘導効果は認められなかった。次にmCT-A/LT-Bを破傷風トキソイド(TT)とともに経鼻免疫した結果、高いレベルのTT特異的な分泌型IgA、血清IgGおよびIgA抗体応答が誘導された。しかしながら、IgE抗体はほとんど検出されなかった。さらに、インフルエンザワクチンをmCT-A/LT-Bとともに経鼻免疫したマウスはインフルエンザウイルス感染を防御した。以上の結果から、mCT-A/LT-Bはそのアジュバント作用誘導に際して、下痢誘導効果およびIgE産生応答を示さないことが示され、安全で有効な粘膜アジュバントであることが示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Kweon, M.N., Yamamoto, M., Watanabe, F., Tamura, S., van Ginkel, F.W., Miyauchi, A., Takagi, H., Takeda, Y., Hamabata, T., Fujihashi, K., McGhee, J.R., Kiyono, H.: "A nontoxic chimeric enterotoxin adjuvant induces protective immunity in both mucosal and systemic compartments with reduced IgE antibodies"Journal of Infectious Diseases. 186・9. 1261-1269 (2002)
• [文献書誌] Boyaka, P.N., Ohmura, M., Fujihashi, K., Koga, T., Yamamoto, M., Kweon, M.N., Takeda, Y., Jackson, R.J., Kiyono, H., Yuki, Y., McGhee, J.R.: "Chimeras of labile toxin one and cholera toxin retain mucosal adjuvanticity and direct Th cell subsets via their B subunit"Journal of Immunology. 170・1. 454-462 (2002)
• [文献書誌] Fukuyama, S., Hiroi, T., Yokota, Y., Rennert, P.D., Yanagita, M., Kinoshita, N., Terawaki, S., Shikina, T., Yamamoto, M., Kurono, Y., Kiyono, H.: "Initiation of NALT organogenesis is independent of the IL-7R, LTβR, and NIK signaling pathways but requires the Id2 gene and CD3^-CD4^+CD45^+ cells"Immunity. 17・1. 31-40 (2002)