IL-12の破骨細胞形成抑制に関するメカニズムの解明

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13771268
• 研究種目: 奨励研究(A)
• 研究機関: 長崎大学
• 研究代表者: 北浦 英樹 長崎大学, 歯学部, 助手 (60295087)
• キーワード: 破骨細胞 / IL-12 / TNF-α / NO / アポトーシス / Fas / FasL / RANKL

研究概要

骨の吸収には、骨芽細胞等から産生されたRANKLによって誘導された破骨細胞による生理的骨吸収と、TNF-αによって誘導された破骨細胞によって引き起こされる病的骨吸収があると考えられている。また、その制御には、様々なサイトカインの関与が考えられている。近年、破骨細胞誘導に免疫担当細胞の関与が多く報告されている。しかしながら、免疫において重要な働きをしているIL-12と骨代謝に関しての報告はほとんどない。そこで本報告では、TNF-αによる破骨細胞誘導へのIL-12の影響の検討を行った。5週齢ddYマウスの大腿骨および脛骨から骨髄細胞を採取し、全骨髄細胞をM-CSFおよびTNF-α存在下で培養し同時にIL-12を0.001〜100ng/mlの濃度で作用させた。また、骨髄細胞から得られたM-CSF依存性のマクロファージ(破骨細胞前駆細胞)をM-CSFおよびTNF-α存在下でIL-12を作用させた。それぞれ、TRAP陽性細胞の数を測定した。全骨髄細胞をM-CSF存在下でTNF-α単独で作用させた場合、破骨細胞様細胞が形成されたが、同時にIL-12を作用させた場合、用量依存的に付着細胞の数が減少した。全細胞を回収し、DNAのフラグメンテーションを解析したところ、約180bpごとのラダーが認められた。また、この作用は、破骨細胞前駆細胞を用いた場合には、起こらなかった。これらのことから、TNF-αとIL-12を同時に全骨髄細胞に作用させるとアポトーシスを誘導する事がわかった。また、その作用は、破骨細胞前駆細胞への直接作用ではないことが示唆された。現在、作用している成分およびIL-12が直接作用している細胞を検討している。

研究成果

• [文献書誌] Kitaura, H., N.Ohara, K.Kobayashi, T.Yamada: "TNF-α-mediated Multiplication of Human Immunodeficiency Virus in Chronically Infected Monocytoid Cells by Mycobacterial Infection"APMIS. 109. 533-540 (2001)
• [文献書誌] Kitaura, H., N.Ohara, K.Kobayashi, T.Yamada: "TNF-α-mediated Activation of HIV-1LTR in Monocytoid Cells by Mycobacteria"FEMS Immunology and Medical Microbiology. 31. 97-103 (2001)
• [文献書誌] Kitaura, H., N.Nakao, N.Yoshida: "Metal elements contained in nonmetallic orthodontic materials"Orthodontic Waves. 60. 414-417 (2001)
• [文献書誌] 北浦英樹, 安達紀子, 永田礼子, 小林和英: "矯正用ワイヤーに対する強電解酸性水の影響について -強電解酸性水によるNi溶出について-"日本口腔機能水雑誌. 2. 11-17 (2001)