脂肪細胞におけるスカベンジャー機能の生理的役割と生活習慣病との関連性の解明

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13771382
• 研究種目: 奨励研究(A)
• 研究機関: 熊本大学
• 研究代表者: 國安 明彦 熊本大学, 薬学部, 助教授 (90241348)
• キーワード: 脂肪細胞 / 貪食 / CD36 / 酸化LDL / スカベンジャー受容体 / 生活習慣病

研究概要

本研究の目的は、最近、我々が見出した脂肪細胞が有する貪食活性の生理的役割を明らかにすると共に、生活習慣病や肥満などの病態との関連性を追究することである。平成13年度は、上記目的を達成するための有用なツール、Northernblotプローブの作製を行い、酸化LDLの脂肪細胞機能への影響を調べた。また、特異抗体を用いてCD36が主たるスカベンジャー受容体であることを明確にした。
1.酸化LDL負荷による前駆脂肪細胞と脂肪細胞の機能変化の解析
脂肪細胞に酸化LDLを負荷して培養し、ノーザンブロット法によりインスリン抵抗性、動脈硬化症や肥満と関連したアディポサイトカイン類(Adiponectin, resistinなど)の発現を調べた。その結果、酸化LDL負荷群でいくつかのサイトカインにおいて有意なmRNA量の増大を観察した。
2.脂肪細胞スカベンジャー分子の同定と酸化LDLの取り込み・分解活性への寄与
マウス3T3-L1細胞を分化誘導刺激を行い脂肪細胞へ分化させ、脂肪細胞に発現するスカベンジャー分子をRT-PCR法で解析した結果、CD36とSR-BIの発現が観察された。さらに、CD36の機能阻害抗体を用いて、脂肪細胞における^<125>I-酸化LDL取り込み・分解活性に対するCD36の寄与率を評価したところ、約65%であった。したがって、CD36が主たる役割を演じていることが明らかとなった。
上記結果をふまえ、次年度は、酸化LDLの脂肪細胞機能への影響をより詳細に調べる予定である。

研究成果

• [文献書誌] Kawahara, K. et al.: "Efficient identification of photolabeled amino acid residues by combining immunoaffinity purification with mass spectrometry-revealing the semotiadil binding site and its relevance to binding sites for myristates in domain III of human serum albumin"Biochem. J.. (in press). (2001)
• [文献書誌] Ohgami, N. et al.: "CD36, a member of class B scavenger receptor family, is a receptor for advanced glycation end products"Ann. N. Y. Acad. Sci.. 947(in press). (2001)
• [文献書誌] Kawahara, K. et al.: "Nitric oxide inhibits the proliferation of murine microglial MG5 cells by a mechanism involving p21 but independent of p53 and cyclic guanosine monophosphate"Neurosci. Lett.. 310. 89-92 (2001)
• [文献書誌] Kawahara, K. et al.: "Co-induction of argininosuccinate synthase, cationic amiono acid transporter-2 and nitric oxide synthase in activated murine microglial cells"Brain Res. Mol. Brain.Res.. 90. 165-173 (2001)
• [文献書誌] Murata, K. et al.: "Asymmetric arrangement of auxiliary subunits of skeletal muscle voltage-gated L-type Ca^<2+> channel"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 282. 284-291 (2001)
• [文献書誌] Ohgami, N. et al.: "CD36, a member of class B scavenger receptor family, as a receptor for advanced glycation end products (AGE)"J. Biol. Chem.. 276. 3195-3202 (2001)