ファイバーミュータントアデノウイルスベクターによる樹状細胞への効率的な遺伝子導入

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13771394
• 研究機関: 京都薬科大学
• 研究代表者: 岡田 直貴 京都薬科大学, 薬学部, 助手 (90312123)
• キーワード: 樹状細胞 / アデノウイルスベクター / 癌免疫療法 / ファイバーミュータント / 遺伝子導入効率

研究概要

補助金交付を受けた平成14年度の研究により、樹状細胞(DC)免疫療法におけるRGDファイバーミュータントアデノウイルスベクター(AdRGD)の有用性について、以下に示す新たな知見を得た。
1.AdRGDによるマウス骨髄由来DC(mBM-DC)への遺伝子導入効率
mBM-DCにおいてはcoxsackie-adenovirus receptor (CAR) mRNAの発現が検出されず、一方、α_vβ_3あるいはα_vβ_5インテグリンのmRNA発現は十分に認められた。本結果を反映して、α_vインテグリン指向性を付与したAdRGDは、従来型Adと比較して、mBM-DCへ極めて高い効率で遺伝子導入できた。
2.AdRGDによりメラノーマ関連抗原(gp100)遺伝子を導入したmBM-DCの抗メラノーマ効果
AdRGDによりgp100遺伝子を導入したmBM-DCをワクチン接種したマウスにおいては、従来型Adを適用した場合と比較して、マウスB16BL6メラノーマの増殖ならびに肺転移がより強力に抑制され、さらに、NK活性およびgp100特異的CTL活性のより効果的な誘導も認められた。
3.AdRGDによりgp100遺伝子を導入したmBM-DCの腫瘍免疫誘導機序
in vivo depletion analysisを行った結果、AdRGDによりgp100遺伝子を導入したmBM-DCのワクチン接種により誘導される腫瘍免疫においては、NK細胞とCD8^+CTLが主要なエフェクター細胞であることが判明した。また、これらエフェクター細胞の十分な活性化は、免疫誘導相におけるCD4+T細胞のヘルパー機能に大きく依存することも明らかとなった。
以上の知見は、AdRGDを用いたDCへの効率の良い腫瘍関連抗原遺伝子導入が、DC免疫療法の有効性向上に繋がることを強く示唆するものである。今後、AdRGDのDCへの遺伝子導入における優位性を生かして、種々の遺伝子修飾を施したDCによる新規免疫療法の開発を試みる予定である。

研究成果

• [文献書誌] N.Okada, Y.Masunaga, Y.Okada, et al.: "Gene transduction efficiency and maturation status in mouse bone marrow-derived dendritic cells infected with conventional or RGD fiber-mutant adenovirus vectors"Cancer Gene Therapy. (in press). (2003)
• [文献書誌] Y.Okada, N.Okada, H.Mizuguchi, et al.: "An investigation of adverse effects caused by the injection of high-dose TNFα-expressing adenovirus vector into established murine melanoma"Gene Therapy. (in press). (2003)
• [文献書誌] Y.Okada, N.Okada, S.Nakagawa, et al.: "Tumor necrosis factor α-gene therapy for an established murine melanoma using RGD (Arg-Gly-Asp) fiber-mutant adenovirus vectors"Japanese Journal of Cancer Research. 93. 436-444 (2002)
• [文献書誌] Y.Okada, N.Okada, S.Nakagawa, et al.: "Fiber-mutant technique can augment gene transduction efficacy and anti-tumor effects against established murine melanoma by cytokine-gene therapy using adenovirus vectors"Cancer Letters. 177. 57-63 (2002)