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本研究は、KDPラットのI型糖尿病原因遺伝子Iddm/kdp1を同定し、当該遺伝子に対応する野生型遺伝子の導入によるKDPラットの表現型回復実験を行って、当該遺伝子が真の原因であると証明することを目的とする。
すでに、当該遺伝子座領域をラット第11染色体上の3.1cMの範囲に限定し、ラットYACおよびBACクローンを用いて当該領域全てを包含する物理地図を構築した。さらに構築した物理地図を用いたゲノム解析により当該領域内に存在する複数の遺伝子を単離している。
今年度は、これらの遺伝子の中から候補遺伝子を選択し、それについてKDPラットと正常ラットとの間でRT-PCR解析および塩基配列の決定等により詳細に比較解析した結果、KDPラットに特異的な変異を同定した。次いで、当該遺伝子に対応する野生型遺伝子をクローニングし、それを強制発現系および組織特異的に発現するプロモーターの支配下に発現するトランスジェニック動物を作出した。現在は戻し交配にてKDPラットの遺伝的背景にトランスジーンを移す作業を進めている。
今後、戻し交配世代において、トランスジーンの有無と膵島炎および糖尿病の発症との関連を調べる。ここで、トランスジーンの導入によってKDPラットの膵島炎および糖尿病の発症が認められなくなることが確認できれば、当該遺伝子が真の原因遺伝子であると証明される。
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