血管平滑筋形質転換におけるβ2-カイメリンを介した細胞内情報伝達の解析

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13832007
• 研究機関: 久留米大学
• 研究代表者: 加藤 誠也 久留米大学, 医学部, 助教授 (60268844)
• 研究分担者: 藤井 輝彦 久留米大学, 医学部, 講師 (50199288)
• キーワード: 血管平滑筋細胞 / β2-カイメリン / プロテインキナーゼC / 形質転換 / 動脈硬化

研究概要

動脈硬化形成時、平滑筋細胞増殖はkey eventで病変部の活性型増殖因子は特異的レセプターを介し細胞増殖を制御する。チロシンキナーゼ型レセプターはphospholipase Cリン酸化とイノシトール代謝回転亢進を経てdiacylglycerol(DG)を産生、従来より内因性DGの唯一の標的は発癌物質phorbol esterの細胞質内レセプター、protein kinase C(PKC)と考えられていたが、近年、低分子量G蛋白Racに対するGTPase activating protein(GAP)、chimaerinが、PKC同様にDGやphorbol esterのTPAに高親和性を示す事が報告された。本年度、我々は引き続き培養血管平滑筋細胞におけるchimaerin発現と形質変化への意義を検討した。培養ヒトおよびrat血管平滑筋細胞を用いbeta2-chimaerin発現をRT-PCR、Western blotting、免疫蛍光染色、HA-tagged beta2-chimaerin発現adenovirus vector(Ad-Chim)を用いた過剰発現系で増殖への影響(細胞数計測、BrdU incorporation assay)を検討した。平滑筋細胞は対照のヒト神経膠腫細胞(U251MG)に比し少量ながら内因性beta2-chimaerinのmRNA、蛋白発現を認めた。Ad-Chim感染群(10-200MOI)は、TPA刺激によるchimaerin分子の凝集と細胞膜移動を示し、PKC inhibitor(GF109203X)は影響しなかった。また対照のAd-LacZ感染群に比し、血清(10%FCS)、PDGF(10ng/ml)、bFGF(50ng/ml)刺激下の増殖が抑制された。chimaerinシグナリングは平滑筋増殖制御の一因と思われた。

研究成果

• [文献書誌] Ikedo H, Tamaki K, Ueda S, Kato S, Fujii M, ten Dijke P, Okuda S: "Smad protein and TGF-β signaling in vascular smooth muscle cells"Int J Mol Med. 11. 645-650 (2003)
• [文献書誌] Kato S, Ueda S, Yamagnuhi M, Miyamoto T, Fujii T, Izumaru S, Kume S, Toyozumi Y, Arima N, Morimatsu M: "Overexpression of p21 Wafl induces apoptosis in immortalized human vascular smooth muscle cells"J Athevoscler Thromb. 10. 239-245 (2003)
• [文献書誌] Kawase Y, Hoshino T, Yokota K, Kuzuhara A, Kirli Y, Nishiwaki E, Yu Maeda, Junji Takeda J, Okamoto M, Kato S, Imaizumi T, Aizawa H, Yoshino K: "Exacerbated and Prolonged Allergic and Non-Allergic Inflammatory Cutaneous Reaction in Mice with Targeted IL-18 Expression in the Skin."J Invest Dermatol. 121. 502-509 (2003)
• [文献書誌] Koga A, Oka N, Kikuchi T, Miyazaki H, Kato S, Imaizumi T: "Adenovirus-mediated overexpression of caveolin-3 inhibits fat cardiomyocyte hypertrophy."Hypertension. 42. 213-219 (2003)
• [文献書誌] Hoshino T, Nakamura H, Okamoto M, Kato S, Araya S, Nomiyama K, Oizumi K, Young HA, Aizawa H, Yodoi J: "Redox-active Protein Thioredoxin Prevents Proinflammatory Cytokine-or Bleomycin-induced Lung Injury"Am J Resp Crit Care. 168. 1075-1083 (2003)
• [文献書誌] Hanada T, Yoshida H, Kato S, Tanaka K, Masutani K, Tsukada J, Nomura Y, Mimata H, Kubo M, Yoshimura A: "Suppressor of cytokine signaling-1 (SOCS1) is essential for suppressing dendritic cell activation and systemic autoimmunity"Immunity. 19. 437-450 (2003)