遺伝子不安定性ならびにメチル化異常による消化器癌の発生とその分子標的治療

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13854016
• 研究機関: 札幌医科大学
• 研究代表者: 今井 浩三 札幌医科大学, 医学部, 教授 (60117603)
• 研究分担者: 豊田 実 札幌医科大学, 医学部, 助手 (70270676) ; 山本 博幸 札幌医科大学, 医学部, 助手 (40332910)
• キーワード: 遺伝子不安定性 / メチル化異常 / 消化器癌 / 癌発生 / 分子標的治療 / 前癌病変

研究概要

これまで我々は、MSI陽性腫瘍においてBax等のアポトーシス関連遺伝子のフレームシフト変異を見い出し、さらに、メチル化の異常が癌化に伴う二次的な現象でなく、癌の発生に重要な役割を果していること、特に細胞周期に関連する重要な14-3-3シグマ遺伝子のメチル化による不活化を見い出し、報告してきた。また、最近、我々は、MSI陽性腫瘍においてβ2-マイクログロブリンのフレームシフト変異を見い出し、このことが発癌と連動する可能性を論じた。また、メチル化の異常が大腸腺腫や肝硬変など癌化の早期の段階でおこることについて知見を蓄積しつつある。そこで、本研究においては、遺伝子不安定性ならびにメチル化異常による消化器癌発生の分子機助序を明確にし、その成果の上に、分子標的治療を案出しようとした。
本年度は、メチル化により不活化されている遺伝子を明らかにするため、申請者らが開発したMCA (methylated CpG island amplification)法を用いて、メチル化のターゲット遺伝子をクローニングし、前癌病変における関連遺伝子の同定を試みた。得られた遺伝子のうち、既知の遺伝子に関しては遺伝子不活化におけるメチル化の検討、臨床例における遺伝子発現低下と、腫瘍の臨床病理学的性格との関係を検討しつつある。Combined bisulfite restriction analysis(COBRA)法や、bisulfite-SSCP法などによる定量的PCR法によるメチル化異常の解析システムを構築し、微量の検体を用いて定量的にメチル化のレベルを測定出来るよう条件設定を行った。

研究成果

• [文献書誌] Yamamoto H: "Gastrointestinal cancer of the microsatellite mutator phenotype pathway"Adv Cancer Res. (in-press). (2002)
• [文献書誌] Nishimura S: "Adenovirus-mediated transfection of Caspase-8 augments anoikis and inhibits. Peritoneal dissemination of human gastric carcinoma cells"Cancer Res. 61. 7009-7014 (2001)
• [文献書誌] Kikuchi T: "Regional methylation and histone deacethylation of p57KIP2 associated with Gene silencing in human tumors"Oncogene. (in-press). (2002)
• [文献書誌] Yamamoto H: "Expression of matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metallo-proteinases in human pancreatic adenocarcinomas : Clinicopathologic and prognostic significance of matrilysin expression"J Clin Oncol. 19. 1118-1127 (2001)
• [文献書誌] Sasaki Y: "Adenovirus-mediated transfer of the p53 family genes, p73 and p51/p63 induces cell cycle arrest and apoptosis in colorectal cancer cell lines : potential application to gene therapy of colorectal cancer"Gene Therapy. 8. 1401-1408 (2001)
• [文献書誌] Adachi Y: "Expression of angiomodulin (tumor derived adhesion factor/MCA25) in invading tumor cells correlates with poor prognosis in human colorectal cancer"Int J Cancer. 95. 216-222 (2001)