天疱瘡病的自己抗体の認識する3次元エピトープの解析

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13877134
• 研究種目: 萌芽的研究
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 安西 秀美 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (90276345)
• 研究分担者: 谷川 瑛子 慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (00203117) ; 天谷 雅行 慶應義塾大学, 医学部, 専任講師 (90212563) ; 西川 武二 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50051579) ; 小林 誠一郎 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (90286055) ; 小林 昌和 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (40286547)
• キーワード: 自己免疫 / 自己抗体 / カドヘリン / エピトープ / 水疱症 / ELISA / 天疱瘡 / デスモグレイン

研究概要

本研究の目的は、尋常性天疱瘡、落葉状天疱瘡、腫瘍随伴性天疱瘡における天疱瘡抗原デスモグレイン1(Dsg1)およびデスモグレイン3(Dsg3)の三次元エピトープを解析し、水疱形成を誘導する病的自己抗体の結合するエピトープを解析することにある。本年度は、Dsg3およびDsg1の分子間で種々の領域を持ったswapping分子をバキュロウイルス発現系にて作成した。さらに、PFおよびPV血清を用いてCompetition ELISAを実施し3次元エピトープマッピングを行った。この結果、Dsg1およびDsg3の主要な3次元エピトープはそれぞれN末側アミノ酸1-161に局在すると考えられ、さらに詳細に検討したところDsg1のアミノ酸26-87、Dsg3のアミノ酸25-88に主要な3次元エピトープが局在すると考えられた。さらにこれらの領域内でDsg1特異的配列を持った変異Dsg3分子を作製し、同様に解析したところ、Dsg1のHis25、Cys28、Ala29に、重要な3次元エピトープが少なくともひとつは存在していると考えられた。次年度は、水疱形成を誘導するエピトープを検討するとともに、腫瘍随伴性天疱瘡において、同様のアプローチを用いて、エピトープ解析を施行する予定である。

研究成果

• [文献書誌] Sekiguchi M, Futei Y, Fujii Y, Iwasaki T, Nishikawa T, Amagai M: "Dominant autoimmune epitopes recognized by pemphigus antibodies map to the N-terminal adhesive region of desmogleins"J Immunol. 167. 5439-5448 (2001)
• [文献書誌] Tsunoda K, Ota T, Suzuki H, Ohyama M, Nagai T, Nishikawa T, Amagai M, Koyasu S: "Pathogenic autoantibody production requires loss of tolerance against desmoglein 3 in both T and B cells in experimental pemphigus vulgaris"Eur J Immunol. 32. 627-633 (2002)
• [文献書誌] Ohyama M, Amagai M, Tsunoda K, Ota T, Koyasu S, Umezawa A, Hata J, Nishikawa T: "Immunologic and histopathologic characterization of active disease mouse model for pemphigus vulgaris"J Invest Dermatol. 118. 199-204 (2002)
• [文献書誌] Futei Y, Amagai M, Ishii K, Kuroda-Kinoshita K, Ohya K, Nishikawa T: "Predominant IgG4 subclass in autoantibodies of pemphigus vulgaris and foliaceus"J Dermatol Sci. 26. 55-61 (2001)
• [文献書誌] 天谷雅行: "皮膚の自己免疫疾患-天疱瘡"実験医学. 19. 180-184 (2001)