| 研究課題/領域番号 |
13877192
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| 研究種目 |
萌芽的研究
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| 研究機関 | 順天堂大学 |
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研究代表者 |
長岡 功 順天堂大学, 医学部, 教授 (60164399)
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| 研究分担者 |
平田 陸正 岩手医科大学, 医学部, 助教授 (20048359)
小林 滋 順天堂大学, 医学部, 講師 (70301497)
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| キーワード | 殺菌ペプチド / Cathelicidin / LPS / エンドトキシンショック / マクロファージ / サイトカイン / TNF-alpha / CD14 |
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| 研究概要 |
[目的]敗血症は救急救命治療の発達した先進国においてもいまだ高頻度に致死的経過をたどる重篤な病態であり、その多くにグラム陰性菌が関与している。本研究は、殺菌作用に加えて、LPS中和能を有する抗菌ペプチドを用いて細菌感染とエンドトキシンの作用の両方をコントロールすることによって新たな敗血症治療法を開発することを目的とする。平成13年度は、cathelicidinファミリーの殺菌ペプチド・ヒトLL-37およびモルモットのホモローグであるCAP11のエンドトキシンショックにおける作用メカニズムを解明するために、CD14陽性のマクロファージ様細胞RAW264.7を用いて、これらペプチドが、RAW264.7細胞へのLPSの結合やLPS刺激によるTNF-alphaの発現にどのような影響をおよぼすかについて検討した。さらに、これらペプチドのマウスエンドトキシンショックモデルにおよぼす効果についても併せて検討した。
[結果]LL-37とCAP11はともにFITC標識LPSのRAW264.7細胞への結合を阻害し、TNF-aphaのmRNAとタンパク質の発現を抑制した。そして、LPS感作赤血球凝集反応によって、LL-37とCAP11がともにLPS結合能を有することがわかった。また、LPS固定化プレートを用いたLPS-binding protein(LBP)の結合反応よって、LL-37とCAP11がLPSのLBPへの結合を阻害することがわかった。さらに、LL-37とCAP11はマウスエンドトキシンショックにおいてTNF-alphaを抑制してマウスの生存率を増加させることがわかった。
[結論]以上の結果から、LL-37とCAP11は、LPSに結合し、LPSのLBPへの結合を阻害することによって、CD14陽性細胞(単球・マクロファージなど)へのLPSの結合を抑制し、TNF-alpha生成を低下させて、エンドトキシンショックにおいて防御的に作用する可能性が考えられた。
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