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1.HIV-1シュードウイルスの作成
パッケージングシグナルとエンベロープを欠損させたHIV-1由来のベクターを作成し、このベクターとVSV-G発現ベクターを、293T細胞にリン酸カルシウム方で遺伝子導入しウイルスを回収した。我々はウイルスを濃縮することで1x10^6のタイターのウイルスを得ることができた。
2.前立腺癌細胞株へのHIV-1 Vprシュードウイルスの導入効率
HIV-1シュードウイルスの導入効率は、HIV-1のnef遺伝子の部位に組み込んだgreen fluorescent protein(GFP)の発現率をフローサイトメーターで測定することで評価した。2種類の前立腺癌細胞株PC-3およびLNCapに、感染の多重度(m. o. i)3で感染させた結果、シュードウイルス導入効率はそれぞれ14.3%±5.8%、9.5%±3.2%であった。
3.HIV-1 Vpr導入によるアポトーシス誘導能の検討
前立腺癌細胞株PC-3およびLNCapに、感染の多重度(m. o. i)3で感染させた結果、アポトーシス導入率はそれぞれ13.3%±2.8%、7.5%±1.2%であった。今後さらに導入効率を高め、adriacin、cisplatinによる抗腫瘍効果における効果を検討する。さらには前立腺癌骨転移モデルを使用し、前幸腺癌骨転移におけるHIV-1 Vprの効果も検討する予定である。
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