2001 年度実績報告書

光応答性DNAによる酵素反応の光制御

研究課題

研究課題/領域番号	13878116
研究機関	東京大学
研究代表者	浅沼浩之東京大学, 先端科学技術研究センター, 助教授 (20282577)
研究分担者	小宮山真東京大学, 先端科学技術研究センター, 教授 (50133096)
キーワード	RNAポリメラーゼ / アゾベンゼン / 光制御 / 転写反応 / プロモーター
研究概要	本研究では、アゾベンゼンをT7プロモーターに導入し、アゾベンゼンのtrans-cis異性化によるT7-RNAPのプロモーター部位への結合を制御することで、転写反応の光制御を目指した。アゾベンゼンはT7プロモーターのnon-template鎖に導入したところ、プロモーターの上流-10と-11位の間にアゾベンゼンを導入した場合に最も効果的な光制御が実現できた。アゾベンゼンの無い天然のプロモーターを用いた場合は、UV照射下でも未照射下とほぼ同じ速度で転写反応が進行した。しかしアゾベンゼン導入プロモーターを用いると、暗条件下では転写産物がほとんど得られなかったのに対し、UV照射下では天然のプロモーターとほぼ同量のm-RNAが得られた。すなわちアゾベンゼンがtrans-体の場合は転写反応が著しく抑制されるのに対し(転写off)、cis-体では転写が天然のプロモーターと同程度進行すると(転写on)が明らかとなった。この光応答性プロモーターを用いれば、転写反応を光照射のみでon-off制御することが可能となった。すなわち、暗条件下では"スイッチ"はoffであったが、UV照射によってスイッチがonになり、m-RNAが生成した。この後、更に可視光照射によって再びスイッチをoffに切り替えることが出来た。この様に、光応答性プロモーターを用いることで転写反応のon-off制御を実現した。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] H.Asanuma, et at.: "Photo-Control of DNA-Duplex Formation by Using Oligonucleotide Carrying an Azobeuzene"CHEMBIOCHEM. 2. 39-44 (2001)
[文献書誌] H.Asanuma, et at.: "Spiropyran as a regulator of DNA hybridization with reversed switching mode to that of azobenzene"Chem. Lett.. 2001. 108-109 (2001)
[文献書誌] H.Asanuma, et at.: "Enantioselective incorporation of azobenzenes into oligodeoxyribonucleotide for the effective photo-regulation of duplex formation"Angew. Chem. Int. Ed. Engl.. 40(14). 2671-2673 (2001)
[文献書誌] H.Asanuma, et at.: "L-Threoninol as a Chiral Linker of Azobenzene for the Effective Photo-regulation of DNA Triplex Formation"Chem. Lett.. 2001. 732-733 (2001)
[文献書誌] H.Asanuma, et at.: "Phenylazonaphthalene as a Superb Photo-Regulator for DNA-Triplex Formation"Tetrahedron Lett.. 42(38). 6723-6725 (2001)
[文献書誌] H.Asanuma, et at.: "Photo-regulation of RNA polymerase reaction by use of modified DNA carrying an azobenzene"Nucleic Acids Symp. Supple.. 1. 55-56 (2001)
[文献書誌] H.Asanuma, et at.: "Regulation of aggregated structure of dye molecules by DNA hybridization"Nucleic Acids Symp. Supple.. 2001. 193-194 (2001)
[文献書誌] H.Asanuma, et at.: "Photo-Regulation of DNA-Triplex Formation by Azobenzene"J. Am. Chem. Soc.. 124. 1877-1883 (2002)

2001 年度 実績報告書

光応答性DNAによる酵素反応の光制御

研究代表者

浅沼 浩之 東京大学, 先端科学技術研究センター, 助教授 (20282577)

研究成果

[文献書誌] H.Asanuma, et at.: "Photo-Control of DNA-Duplex Formation by Using Oligonucleotide Carrying an Azobeuzene"CHEMBIOCHEM. 2. 39-44 (2001)

[文献書誌] H.Asanuma, et at.: "Spiropyran as a regulator of DNA hybridization with reversed switching mode to that of azobenzene"Chem. Lett.. 2001. 108-109 (2001)

[文献書誌] H.Asanuma, et at.: "Enantioselective incorporation of azobenzenes into oligodeoxyribonucleotide for the effective photo-regulation of duplex formation"Angew. Chem. Int. Ed. Engl.. 40(14). 2671-2673 (2001)

[文献書誌] H.Asanuma, et at.: "L-Threoninol as a Chiral Linker of Azobenzene for the Effective Photo-regulation of DNA Triplex Formation"Chem. Lett.. 2001. 732-733 (2001)

[文献書誌] H.Asanuma, et at.: "Phenylazonaphthalene as a Superb Photo-Regulator for DNA-Triplex Formation"Tetrahedron Lett.. 42(38). 6723-6725 (2001)

[文献書誌] H.Asanuma, et at.: "Photo-regulation of RNA polymerase reaction by use of modified DNA carrying an azobenzene"Nucleic Acids Symp. Supple.. 1. 55-56 (2001)

[文献書誌] H.Asanuma, et at.: "Regulation of aggregated structure of dye molecules by DNA hybridization"Nucleic Acids Symp. Supple.. 2001. 193-194 (2001)

[文献書誌] H.Asanuma, et at.: "Photo-Regulation of DNA-Triplex Formation by Azobenzene"J. Am. Chem. Soc.. 124. 1877-1883 (2002)

2001 年度実績報告書

浅沼浩之東京大学, 先端科学技術研究センター, 助教授 (20282577)