ラット味覚細胞株の樹立

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 13878150
• 研究種目: 萌芽的研究
• 研究機関: 福井県立大学
• 研究代表者: 海藤 敏雄 福井県立大学, 生物資源学部, 助教授 (80185701)
• 研究分担者: 高橋 正和 福井県立大学, 生物資源学部, 助手 (80315837)
• キーワード: 味覚細胞

研究概要

味覚細胞株の作成(味覚細胞の永久細胞株化を行う)
ラット舌の葉状乳頭および有郭乳頭部分より味蕾を細切し、酵素処理し味覚細胞を含む細胞を集めた。4日間プライマリーカルチャーした後、接着細胞にpSV3-neoプラスミドDNAをCa-phosphate法を用いてTransfectionし、G-418で薬剤選択した。
細胞株の抗原解析
増殖している細胞を免疫化学染色したところ、LargeT抗原(核内のみ)、Gustducin抗原、NGF抗原、BDNF抗原は陽性であった。一方、E-Cadherin, P-Cadherin, LI-Cadherin, NCAMなどの組織で発現している接着抗原は陰性であった。
細胞株の味物質刺激に対する応答
増殖している細胞にCa2+に反応する蛍光物質Fluo-3を取り込ませ、苦味物質の1つであるcycloheximide(50μM)を加えると、15秒〜30秒で応答が観測された。この値は新鮮な葉状乳頭の味蕾組織を使用したcycloheximide刺激に対する応答(他の人のレポート)と同レベルと考えられる。