2001 年度実績報告書

単一神経細胞内遺伝子発現の新たな解析方法の開発

研究課題

研究課題/領域番号	13878169
研究種目	萌芽的研究
研究機関	大阪大学
研究代表者	福田淳大阪大学, 医学系研究科, 教授 (90028598)
研究分担者	澤井元大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (20202103)
キーワード	網膜神経節細胞 / mRNA / 細胞内注入 / biotin / avidin / rat / 紫外線照射 / 蛍光顕微鏡
研究概要	本研究は、単一網膜神経節細胞内のmRNA発現パターンを解析する新たな方法を開発することを目的とする。今年度は、その第一段階として、予め蛍光標識しておいた網膜神経節細胞に、紫外光照射によって核酸に結合する性質をもった標識物質を蛍光顕微鏡下で細胞内注入し、細胞内の発現mRNAを標識することが可能かどうかを実験的に検討した。 (1)ビオチン化化合物で、紫外線照射により核酸に選択的に結合するphotoprobe biotin(Vector社製)が目的とする標識物質の特徴を備えており、かつ分子量が小さく細胞内注入が可能であることから最も有用であると考えられた。 (2)蛍光顕微鏡観察下のラット遊離網膜標本において、単一網膜神経節細胞にphotoprove biotinを細胞内注入するシステムを完成させた。 (3)photoprove biotinの細胞内注入のための通電量、通電時間、極性を検討し、各パラメータの有効値を決定できた。 (4)蛍光顕微鏡下で、photoprove biotinを細胞内注入し、網膜固定後、Avidin-HRPと反応させて、注入されたphotoprove biotinを可視化することで成功した。 (5)核酸とを結合させるための、最適な紫外光の波長、強度、照射時間の検討を行った。以上の結果をふまえて注入したphotoprove biotinを顕微鏡下で細胞内mRNAと結合させる段階に達した。

研究成果

(9件)

すべてその他

すべて文献書誌 (9件)

[文献書誌] Watanabe, M. et al.: "survival of retinal ganglion cells after transection of the optic nerve in adult cats : quantitative study within two weeks"Visual Neurosci. 18. 137-145 (2001)
[文献書誌] Morimoto, T. et al.: "Electrical stimulation enhances the survival of axotomized retinal genglion cells in vivo"Neuroreport. 13. 227-230 (2002)
[文献書誌] Sauve, Y. et al.: "Topographic specificity in reinnervation of the superior colliculus by regenerated retinal ganglion cell axons in adult hamsters"J. Neurosci. 21. 951-960 (2002)
[文献書誌] Yakura T. et al.: "Effect of bcl-2 overexpression on establishment of ipsilateral retinocollicular projection"Neuroscience. (in press).
[文献書誌] 矢倉徹他: "哺乳類の視交叉同側性視神経投射形成のメカニズムを中心に"脳21. 5(1). 14-18 (2002)
[文献書誌] 矢倉徹他: "生後発生過程における同側性網膜-上丘投射のrefinementのメカニズム"Molecular Medicine. 39. 175-184 (2002)
[文献書誌] 澤井元: "再生視神経の上丘支配様式-レチノトピーの再建について"Molecular Medicine. 39. 192-198 (2002)
[文献書誌] 澤井元他: "軸索切断による逆行性変性過程にグルタミン酸毒性は関与しているか"Molecular Medicine. 39. 80-86 (2002)
[文献書誌] 福田淳: "脳と視覚-何をどう見るか"共立出版. 339 (2002)

2001 年度 実績報告書

単一神経細胞内遺伝子発現の新たな解析方法の開発

研究代表者

福田 淳 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (90028598)

研究成果

[文献書誌] Watanabe, M. et al.: "survival of retinal ganglion cells after transection of the optic nerve in adult cats : quantitative study within two weeks"Visual Neurosci. 18. 137-145 (2001)

[文献書誌] Morimoto, T. et al.: "Electrical stimulation enhances the survival of axotomized retinal genglion cells in vivo"Neuroreport. 13. 227-230 (2002)

[文献書誌] Sauve, Y. et al.: "Topographic specificity in reinnervation of the superior colliculus by regenerated retinal ganglion cell axons in adult hamsters"J. Neurosci. 21. 951-960 (2002)

[文献書誌] Yakura T. et al.: "Effect of bcl-2 overexpression on establishment of ipsilateral retinocollicular projection"Neuroscience. (in press).

[文献書誌] 矢倉 徹 他: "哺乳類の視交叉 同側性視神経投射形成のメカニズムを中心に"脳21. 5(1). 14-18 (2002)

[文献書誌] 矢倉 徹 他: "生後発生過程における同側性網膜-上丘投射のrefinementのメカニズム"Molecular Medicine. 39. 175-184 (2002)

[文献書誌] 澤井 元: "再生視神経の上丘支配様式-レチノトピーの再建について"Molecular Medicine. 39. 192-198 (2002)

[文献書誌] 澤井 元 他: "軸索切断による逆行性変性過程にグルタミン酸毒性は関与しているか"Molecular Medicine. 39. 80-86 (2002)

[文献書誌] 福田 淳: "脳と視覚-何をどう見るか"共立出版. 339 (2002)

2001 年度実績報告書

福田淳大阪大学, 医学系研究科, 教授 (90028598)

[文献書誌] 矢倉徹他: "哺乳類の視交叉同側性視神経投射形成のメカニズムを中心に"脳21. 5(1). 14-18 (2002)

[文献書誌] 矢倉徹他: "生後発生過程における同側性網膜-上丘投射のrefinementのメカニズム"Molecular Medicine. 39. 175-184 (2002)

[文献書誌] 澤井元: "再生視神経の上丘支配様式-レチノトピーの再建について"Molecular Medicine. 39. 192-198 (2002)

[文献書誌] 澤井元他: "軸索切断による逆行性変性過程にグルタミン酸毒性は関与しているか"Molecular Medicine. 39. 80-86 (2002)

[文献書誌] 福田淳: "脳と視覚-何をどう見るか"共立出版. 339 (2002)