2002 年度実績報告書

OLETFにおけるNIDDM原因遺伝子のポジショナルキャンディデートクローニング

研究課題

研究課題/領域番号	14013035
研究機関	京都大学
研究代表者	山田宜永京都大学, 農学研究科, 助教授 (40253207)
キーワード	OLETF / NIDDM / ポジショナルキャンディデート / クローニング / コンジェニック / QTL / ファインマッピング / 肥満
研究概要	・コンジェニック解析により、14個のNidd QTLの内、Nidd1、2、8、10および6の5個のQTLのみについて、OLETFアリルが劣性様式でNIDDMおよび肥満に影響すると確証された。それらのコンジェニックより、Nidd1と2、Nidd1と10およびNidd2と10のダブルコンジェニックを作製したが、QTL解析で検出されたエピスタシス効果は確証されなかった。また、Nidd10については、β細胞増殖能低下という表現型についてもQTLの確証がなされた。・ゲノムシフトアプローチにより得られたNidd1、2、6、8(Nidd10についてはCckar遺伝子が原因遺伝子であると推定された)における7個のポジショナルキャンディデート(Hnf4g、Nkx6a、Pnlip・Pnliprp1・Pnliprp2、およびCapn10・Neurod1遺伝子)のマッピング・変異・発現レベル解析、およびそのQTLゲノム領域に存在するラットUnigeneのマクロアレイ解析・competitive RT-PCR解析を行った。その結果、腸管からの脂肪吸収に関わるPnlipおよびPnliprp2遺伝子は、コード領域について変異は見られないものの、コントロールに比べOLETFで若齢時の膵における発現レベルが増加および減少しており、Nidd6の有望な候補となると考えられた。さらに、糖新生に関与しているPgc1遺伝子は、膵・肝・脂肪・筋肉組織において齢数時に関わらず、OLETF特異的な発現レベルの増加を示すことから、Nidd2の有望な候補となると考えられた。ラットゲノムTraceおよびHTGSデータベースを利用することで、Pnlip、Pnliprp2およびPgc1遺伝子のプロモーター領域およびイントロン領域を含めたラットゲノム配列についての検索を終了した。また、Niddlおよび8については、QTLゲノム領域に存在するラットUnigeneをプローブに、OLETF、F344およびコンジェニックの膵・肝・脂肪・筋肉組織からの経時的なRNAサンプルをターゲットとしたマクロアレイ解析を実行中である。・Nidd2および6については、そのゲノム領域内で組み換えが生じている(コンジェニック×F344)×コンジェニックのバッククロス交雑群での雄選抜個体が作製された。さらに、その個体を用いることで、当該形質が単純なメンデル遺伝様式に従って分離しており、当該QTLを単一遺伝子変異として扱うことができると明らかになったことから、QTLのファインマッピング、染色体位置の決定がなされた。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Tanomura, H.: "Detection of a quantitative trait locus for intramuscular fat accumulation using the OLETF rat"J.Vet.Med.Sci.. 64. 45-50 (2002)
[文献書誌] Kose, H.: "Examination of OLETF-derived non-insulin-dependent diabetes mellitus QTL by construction of a series of congenic rats"Mamm.Genome. 13. 558-562 (2002)
[文献書誌] Yamada, T.: "Genetic dissection of non-insulin-dependent diabetes mellitus in the OLETF rat"Reproductive Biotechnology. (in press).
[文献書誌] Taniguchi, Y.: "Genomic structure and promoter analysis of the bovine leptin gene"IUBMB Life. 53. 131-135 (2002)
[文献書誌] Muramatsu, Y.: "Chromosomal assignments of expressed sequence tags for ACTG1, AHSG, COL1A1,GNAS1,and RPLP1 expressed abundantly in the bovine fetus"Anim.Genet.. 33. 230-231 (2002)
[文献書誌] Nagata, Y.: "Differential display method used for the comparison of mRNA expression level among many samples"J.Anim.Genet.. 30. 3-10 (2002)

2002 年度 実績報告書

OLETFにおけるNIDDM原因遺伝子のポジショナルキャンディデートクローニング

研究代表者

山田 宜永 京都大学, 農学研究科, 助教授 (40253207)

研究成果

[文献書誌] Tanomura, H.: "Detection of a quantitative trait locus for intramuscular fat accumulation using the OLETF rat"J.Vet.Med.Sci.. 64. 45-50 (2002)

[文献書誌] Kose, H.: "Examination of OLETF-derived non-insulin-dependent diabetes mellitus QTL by construction of a series of congenic rats"Mamm.Genome. 13. 558-562 (2002)

[文献書誌] Yamada, T.: "Genetic dissection of non-insulin-dependent diabetes mellitus in the OLETF rat"Reproductive Biotechnology. (in press).

[文献書誌] Taniguchi, Y.: "Genomic structure and promoter analysis of the bovine leptin gene"IUBMB Life. 53. 131-135 (2002)

[文献書誌] Muramatsu, Y.: "Chromosomal assignments of expressed sequence tags for ACTG1, AHSG, COL1A1,GNAS1,and RPLP1 expressed abundantly in the bovine fetus"Anim.Genet.. 33. 230-231 (2002)

[文献書誌] Nagata, Y.: "Differential display method used for the comparison of mRNA expression level among many samples"J.Anim.Genet.. 30. 3-10 (2002)

2002 年度実績報告書

山田宜永京都大学, 農学研究科, 助教授 (40253207)