2002 年度実績報告書

p27^<kip1>の発現量低下による予後不良の癌形質の形成メカニズムの研究

研究課題

研究課題/領域番号	14026019
研究機関	浜松医科大学
研究代表者	北川雅敏浜松医科大学, 医学部, 教授 (50294971)
研究分担者	小田敏明浜松医科大学, 医学部, 助教授 (90126805) 内田千晴浜松医科大学, 医学部, 助手 (60223567) 北川恭子浜松医科大学, 医学部, 助手 (20299605)
キーワード	p27^<Kip1> / ジーンターゲッティング / 癌 / 予後 / 細胞周期
研究概要	[研究目的]予後不良の癌に対する効果的診断および治療法の開発が期待されている。近年これら悪性度の高い癌ではCDK阻害タンパクであるp27^<Kip1>の分解が亢進していることが報告された。また、我々の肺癌の結果および他のグループの最近の結果では、悪性度の高い癌においてp27^<Kip1>のユビキチンリガーゼとされるSkp2の発現が有意に高いことがわかってきた。しかしながらSkp2の高発現やp27^<Kip1>の分解亢進と、転移浸潤能の増加、血管遊走能の上昇、薬剤耐性などの予後不良の癌形質の形成との因果関係は全く不明である。そこで申請者は本研究課題において、Skp2の高発現およびp27^<Kip1>の分解亢進と癌形質の悪性度増強の因果関係を実験的に証明するとともに、癌形質の悪性化に影響を及ぼすキー遺伝子を同定し、予後不良化のメカニズムを解明することをめざす。 [方法と結果]核型が正常なヒト大腸癌細胞HCT116細胞を用いて、(1)Skp2高発現ヒト大腸癌細胞(HCT-Skp2)、(2)p27遺伝子をソマティックノックアウトし、p27^<Kip1>-ヘテロノックアウトヒト大腸癌(HCT-p27hKO)細胞を作製することに成功した。いずれの細胞もp27^<Kip1>タンパク質の存在量が有意に低下していた。興味深いことに、HCT-Skp2の造腫瘍性は親株に比べて高かったがHCT-p27hKOでは親株と同程度で、Skp2高発現による悪性化がp27^<Kip1>以外の標的であることが示唆された。これらの細胞を用いたマイクロアレイ解析によりHCT-Skp2特異的に発現が低下する複数の遺伝子PPAG(Poor Prognosis Associated Gene candidates)を同定した。さらにこれらの遺伝子の転写制御を行うある転写因子(PPAG-TF1:仮名)がSkp2の新たなターゲットであるという予備的データを得ており、今後さらに解析を進める予定である。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Uchida, C. et al.: "The role of Sp1 and AP-2 in basal and protein kinase A-induced expression of mitochondrial serine : pyruvate aminotransferase in hepatocytes"Journal of Biological Chemistry. 277. 39082-39092 (2002)
[文献書誌] Mizuno, T. et al.: "Analyses in transfected cells and in vitro of a putative peroxisomal targeting signal of rat liver serine : pyruvate aminotransferase"Hitochem. Cell Biol.. 118. 321-328 (2002)
[文献書誌] Matsumoto A. et al.: "Bisphenol a levels in human urine"Environ. Health Perspect.. 111. 101-104 (2003)
[文献書誌] Katayama, K. et al.: "Cdk4/Cyclin D1 kinase, a universal and critical regulator of apoptosis"Anticancer Res.. 23. 235-244 (2003)
[文献書誌] Inui, N. et al.: "High expression of Cks1 in human non-small cell lung carcinomas"Biochem. Biophys. Research. Communication. 303. 973-984 (2003)
[文献書誌] Isse, T. et al.: "Diminished alcohol preference in transgenic mice lacking aldehyde dehydrogenase activity"Pharmacogenetics. 12. 621-626 (2002)

2002 年度 実績報告書

p27^<kip1>の発現量低下による予後不良の癌形質の形成メカニズムの研究

研究代表者

北川 雅敏 浜松医科大学, 医学部, 教授 (50294971)

研究成果

[文献書誌] Uchida, C. et al.: "The role of Sp1 and AP-2 in basal and protein kinase A-induced expression of mitochondrial serine : pyruvate aminotransferase in hepatocytes"Journal of Biological Chemistry. 277. 39082-39092 (2002)

[文献書誌] Mizuno, T. et al.: "Analyses in transfected cells and in vitro of a putative peroxisomal targeting signal of rat liver serine : pyruvate aminotransferase"Hitochem. Cell Biol.. 118. 321-328 (2002)

[文献書誌] Matsumoto A. et al.: "Bisphenol a levels in human urine"Environ. Health Perspect.. 111. 101-104 (2003)

[文献書誌] Katayama, K. et al.: "Cdk4/Cyclin D1 kinase, a universal and critical regulator of apoptosis"Anticancer Res.. 23. 235-244 (2003)

[文献書誌] Inui, N. et al.: "High expression of Cks1 in human non-small cell lung carcinomas"Biochem. Biophys. Research. Communication. 303. 973-984 (2003)

[文献書誌] Isse, T. et al.: "Diminished alcohol preference in transgenic mice lacking aldehyde dehydrogenase activity"Pharmacogenetics. 12. 621-626 (2002)

2002 年度実績報告書

北川雅敏浜松医科大学, 医学部, 教授 (50294971)