| 研究課題/領域番号 |
14035243
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| 研究機関 | 徳島大学 |
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研究代表者 |
塩見 春彦 徳島大学, ゲノム機能研究センター, 教授 (60202107)
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| 研究分担者 |
岡野 栄之 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (60160694)
塩見 美喜子 徳島大学, ゲノム機能研究センター, 助教授 (20322745)
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| キーワード | RNA結合蛋白質 / FMR1 / RNAi / Musashi / ショウジョウバエ / 神経機能 / 神経幹細胞 / 遺伝子発現制御 |
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| 研究概要 |
既に脆弱X蛋白質のショウジョウバエ相同体dFMR1タンパク質がRNAi分子経路と相互作用することを明らかにし、「RNAi分子装置の異常による疾患」という新しい領域を開いたが、さらにdFMR1複合体(dFMR1-RNP)の精製を進め、この複合体にはRNAi関連因子AGO2とDmp68のみならず、性行動関連因子Lingererが含まれていることを明らかにした。また、この複合体には約20塩基長と約70塩基長の2群の小分子RNAが含まれていることも判明した。70塩基長の小分子RNAはdFMR1とLingererの相互作用に重要であり、一方、クローニングを進めた結果、約20塩基長の小分子RNAは内在性siRNAであると考えられた。現在、これら小分子RNAの機能解析を進めている。また、Lingererにはヒト相同体(AD-010とNICE-4)が存在し、これらがヒトFMR1と相互作用することを確認した。また、AGO2と相互作用するは内在性siRNAのクローニング法を確立し、現在、それらの配列情報を得始めている。
一方、Musashi1(Msi1)に結合する共役蛋白質の濃縮・精製を行い、MALDI-TOF MS法でPoly(A)Binding Protein1(PABP1)を同定した。Msi1は、C末端側の約15アミノ酸を介してPABP1のeIF4G結合部位(PABP1のN末部位)に結合し、eIF4GとPABP1の結合を積極的に解除または弱めていることをin vitroの結合実験で明らかにした。またMsi2単独欠損マウスの個体の解析を行ったところ、背側神経節の発達不全のために脊髄との線維連絡が低下していることが明らかとなった。さらに、Msi2の標的遺伝子の解析を行ったところプライオトロピン(ptn)が同定され、ptnのmRNAの3'非翻訳領域に特異的に結合し、その発現を転写後調節していることが明らかになった。
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