消化器癌に対する新しい免疫療法と診断法の開発

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14104013
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 河上 裕 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50161287)
• 研究分担者: 住本 秀敏 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (00306838) ; 桜井 敏晴 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (20101933) ; 藤田 知信 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (20199334) ; 鈴木 ゆり子 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (40255435)
• キーワード: 腫瘍抗原 / 癌精巣抗原 / 免疫療法 / SEREX / DNAチップ / RDA / SCID / 樹状細胞

研究概要

本年度は、各種消化器癌と正常では精巣や胎盤などの限局した組織にしか発現せず、免疫療法の標的として期待されているcancer-testis抗原(CT抗原)の体系的単離のために、2つのアプローチを試みた。一つは、消化器癌患者血清中IgG抗体を精巣cDNAライブラリーのスクリーニングに用いたcDNA発現クローニング法(SEREX法)によるCT抗原の単離、もう一つは、SAGE法、DNAチップを用いた網羅的遺伝子発現解析によるcDNAプロファイル比較と、低発現分子の単離に優れるPCRを用いたcDNAサブトラクション法(RDA法)により、まず精巣特異的分子を体系的に同定し、次に、癌患者における免疫原性を検討する方法である。前者により、食道癌患者血清を用いて新規CT抗原BORISを、膵臓癌患者血清を用いてKU-TES-1を単離同定した。これらは消化器癌に発現がみられ、癌患者血清中にIgG抗体が検出され、消化器癌患者に免疫原性をもつCT抗原として、今後、その臨床応用の可能性を検討する。後者に関しては、精巣のSAGE、GeneChip解析を行い、他の組織の発現プロファイルと比較することにより、また、精巣と他組織とのRDA法により、多数の精巣特異的分子を同定した。その中には、RT-PCR法により各種癌細胞株に発現する分子もみつかり、次年度、大腸菌組み換え蛋白を作製し、癌患者血清IgG抗体の反応性を検討する予定である。また、SCIDマウスに手術摘出ヒト腫瘍を皮下移植し、マウス血清中にSEREX法に使用するのに十分なヒトIgG抗体が得られることを確認した。次年度は、この血清を用いて腫瘍組織浸潤B細胞が認識する腫瘍抗原の単離を行う。単離した腫瘍抗原に対するT細胞を誘導するために、ヒトCD34_+造血前駆細胞から誘導した樹状細胞にレンチウイルスベクターで腫瘍抗原を導入発現させる方法を開発した。

研究成果

• [文献書誌] Endo T., Kawakami Y., et al.: "In Situ Cancer Vaccination with a Replication-Conditional HSV for the Treatment of Liver Metastasis of Colon Cancer"Cancer Gene Ther.. 9. 142-148 (2002)
• [文献書誌] Sumimoto H., Kawakami Y., et al.: "Rapid and efficient generation of lentivirally gene-modified dendritic cells from DC progenitors with bone marrow stromal cells"J Immunological Methods.. 271. 153-165 (2002)
• [文献書誌] Toda M., Kawakami Y., et al.: "Immuno-Viral Therapy of Brain Tumors by Combination of Viral Therapy with Cancer Vaccination Using a Replication-Conditional HSV"Cancer Gene Ther.. 9. 356-364 (2002)
• [文献書誌] Matsushita M., Kawakami Y., et al.: "Preferentially Expressed Antigen of Melanoma (PRAME) in the Development of Diagnostic and Therapeutic Methods for Hematological Malignancies"Leukemia and lymphoma.. 44・3. 439-444 (2003)
• [文献書誌] Kuwana M., Kawakami Y., et al.: "Identification of an immunodominant epitope on RNA polymerase III recognized by systemic sclerosis sera: application to enzyme-linked immunosorbent assay"Arthritis Rheum.. 46・10. 2742-2747 (2002)
• [文献書誌] Kuwana M., Kawakami Y., et al.: "Spleen is a primary site for activation of platelet-reactive T and B cells in patients with immune thrombocytopenic purpura"J. Immununol.. 168・7. 3675-3682 (2002)
• [文献書誌] Kawakami Y.: "Human melanoma antigens recognized by CD8_+ T cells, in "Tumor Antigens Recognized by T cells and Antibodies""Taylor & Francis.. 28 (2003)