細胞老化の分子機構解明及び老化を標的とした癌分子標的療法の開発

2006 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 14104014
• 研究種目: 基盤研究(S)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 産婦人科学
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 和氣 徳夫 九州大学, 医学研究院, 教授 (50158606)
• 研究分担者: 小林 裕明 九州大学, 病院・講師 (70260700) ; 加藤 聖子 九州大学, 生体防御医学研究所, 講師 (10253527) ; 岡田 顕三 九州大学, 病院・助手 (30294929) ; 上岡 陽亮 九州大学, 病院・助手 (50372743)
• 研究期間 (年度): 2002 – 2006
• キーワード: NECC1遺伝子 / ノックアウトマウス胎盤 / トロホブラスト幹細胞 / 巨細胞 / MDM2蛋白 / 癌細胞老化 / 癌分子標的療法 / HDAC inhibitor

研究概要

(1)NECC1/HOP遺伝子機能解析:NECC1 KOマウスを作成し、胎盤における組織構築の変化を解析した結果、NECC1野生型に比し、KO胎盤では巨細胞の肥厚及び海綿状栄養膜細胞の発生障害が観察された。マウス胎盤におけるNECC1発現は一過性に認められ8.5-11.5dpcにのみ発現を認めた。マウストロホブラスト幹細胞さらには幹細胞としての性格を有するRCHO細胞を用い、様々な手段で分化を誘導し分化誘導におけるNECC1機能を解析した。NECC1は幹細胞から巨細胞への分化を負に制御していることが判明した。
一方NECC1はエストロゲン存在下におけるホルモン依存性癌の細胞増殖を負に制御した。E2により活性化したsrc/AkrシグナルはSRFに伝達され、NECC1はそれを負に制御するためであることを明らかにした。
(2)MDM2siRNAによるMDM2蛋白発現抑制のER発現(+)、MDM2蛋白発現亢進、p53野生型癌細胞を用いsiRNAによるMDM2蛋白発現抑制効果を解析した。MDM2siRNAはこれら癌細胞でのMDM2蛋白発現を顕著に抑制した。MDM2蛋白発現抑制に伴い細胞はGo/G1期に集積し増殖抑制が観察された。平坦化及び巨細胞化といった細胞形態変化が出現し、β-Gal陽性細胞も出現したためがん細胞老化が誘導されたと示唆された。
(3)SP1阻害剤MithramycinによるMDM2蛋白発現抑制;Mithramycinは抗白血病薬として米国での使用承認を受けている。最近転写因子SP1の阻害作用を保有することが判明した。SP1蛋白発現を抑制することによりMDM2プロモータ領域中のSP1結合サイトを介したMDM2蛋白発現を抑制する。Mithramycin(20-60nM)をp53野生型癌細胞に投与すると細胞はアポトーシスにより死滅する。SP1蛋白の低下及びp53蛋白安定化が観察された。MDM2蛋白量はMithramycinによるp53蛋白安定化を反映し増大した。MithramycinはMDM2P1プロモータ活性を抑制し、二次的にp2プロモータ活性を亢進した。P2プロモータ活性にはMDM2 G309T一塩基多型が関与していた。

研究成果

• [雑誌論文] Characterization of side population cells (SP cells) in human normal endometrial cells (2007)
  • 著者名/発表者名: Kato K, Yoshimoto M, Kato K, Adachi S, Yamayoshi A, Arima T, Asanoma K, Kyo S, Nakahata T, Wake N
  • 雑誌名: Human Reproduction 22 ページ: 1214-1223
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] An inhibitory effect on cell proliferation by blockage of the MAPK/Estrogen Receptor/MDM2 signal pathway in gynecologic cancer (2007)
  • 著者名/発表者名: Suga S, Kato K, Yamayoshi A, Adachi S, Asanoma K, Yamaguchi S, Arima T, Kinoshita K, Wake N
  • 雑誌名: Gynecologic Oncology 105 ページ: 341-350
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] An inhibitory effect on cell proliferation by blockage of the MAPK/Estrogen Receptor/MDM2 signal pathway in gynecologic cancer (2007)
  • 著者名/発表者名: Suga S, KatoK, Yamayoshi A, Adachi S, Asanoma K, Yamaguchi S, Arima T, Kinoshita K, Wake N
  • 雑誌名: Gynecologic Oncology 105 ページ: 341-350
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Induction of human endometrial cancer cell senescence through modulation of HIF-1α activity byEGLN1 (2006)
  • 著者名/発表者名: Kato H, Inoue T, Asanoma K, Nishimura C, Matsuda T, Wake N
  • 雑誌名: International Journal of Cancer 118 ページ: 1144-1153
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Activation of STAT3/5 Signal Pathways in Complete Mole and Repression in Choriocarcinoma Cell Lines (2006)
  • 著者名/発表者名: Kato H, Inoue T, Asanoma K, Matsuda T, Yoshikawa Y, Wake N
  • 雑誌名: Journal of Reproductive Medicine 51 ページ: 41-48
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Establishment of the primary imprint of the HYMAI/PLAGL1 imprint control region During oogenesis (2006)
  • 著者名/発表者名: Arima T, Wake N
  • 雑誌名: Cytogenet Genome Res 113 ページ: 247-252
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Adenovirus-Mediated Calponin h1 Gene Therapy Directed Against Peritoneal Dissemination of Ovarian Cancer : Bifunctional Therapeutic Effects on Peritoneal Cell Layerand Cancer Cells (2006)
  • 著者名/発表者名: Ogura T, Kobayashi H, Ueoka Y, Okugawa K, Kato K, Hirakawa T, Hashimoto S, Taniguchi S, Hashimoto S, Wake N, Nakano H
  • 雑誌名: Clin Cancer Res 12(17) ページ: 5216-5223
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Adenovirus-Mediated Calponin h1 Gene Therapy Directed Against Peritoneal Dissemination of Ovarian Cancer : Bifunctional Therapeutic Effects on Peritoneal Cell Layer and Cancer Cells (2006)
  • 著者名/発表者名: Ogura T, Kobayashi H, Ueoka Y, Okugawa K, Kato K, Hirakawa T, Hashimoto S, Taniguchi S, Hashimoto S, Wake N, Nakano H
  • 雑誌名: Clin Cancer Res 12(17) ページ: 5216-5223
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より