| 研究課題/領域番号 |
14206014
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| 研究種目 |
基盤研究(A)
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| 配分区分 | 補助金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 研究分野 |
生物生産化学・応用有機化学
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
安保 充 東京大学, 大学院農学生命科学研究科, 講師 (00272443)
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| 研究分担者 |
山崎 素直 長崎大学, 環境科学部, 教授 (00011982)
吉村 悦郎 東京大学, 大学院農学生命科学研究科, 教授 (10130303)
佐藤 記一 東京大学, 大学院農学生命科学研究科, 助手 (50321906)
藤井 紳一郎 産業技術総合研究所, 生体機能工学研究部門, 研究員 (10415739)
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| 研究期間 (年度) |
2002 – 2005
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| キーワード | マイクロナノデバイス / 環境分析 / 細胞・組織 / システムオンチップ / アレルギー / センサー |
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| 研究概要 |
本研究で開発した生化学分析システムとして、環境分析では、巻貝中のステロイドホルモン分析、河川中の亜硫酸イオン、亜硝酸イオンの分析システムを作製した。また、生物活性物質分析では、サイトカイン類のイムノアッセイチップ、細胞保持型のバイオアッセイチップを作製した。具体的には、ラットマスト細胞から放出されるヒスタミンの分析、マウスマクロファージから放出されるTNF-αの分析チップを作製した。
マイクロチップ作製法としては、高粘性フォトレジストを用いたフォトリソグラフィーにより、スライドグラスのマイクロ簡易加工法を開発した。この方法により作製したスライドグラスを鋳型とし、ポリジメチルシロキサン(PDMS)マイクロチップを作製した。また、高感度分析を行う検出器としてマイクロチップ分析に特化した落射型蛍光ユニットの開発も行った。また、培養細胞をマイクロチップ上に保持し、培養を行う技術、さらに、マイクロ流路の造形により、試薬の濃度勾配を得られるチップの作製も行った。
作製した分析システムにより、ステロイドホルモン分析では、従来のELISA法より一桁以上感度が上がり、分析時間を1/3に短縮することができた。また、本システムにより、海産巻貝類であるイボニシの卵巣中に含まれるステロイドホルモンを個体別に定量することが可能となった。同様に、TNF-αの分析でも従来の分析時間を1/3に短縮することができた。
ヒスタミン遊離試験では、必要細胞数を従来の1/100程度に低減することに成功し、連続送液を行うことで、細胞からのヒスタミン遊離を連続的にモニタリングすることが可能になった。
抗ガン剤感受性試験用マイクロチップは、抗ガン剤溶液と培養液の混合時に形成される濃度勾配を利用して、あらかじめ培養されていた胃ガン細胞を生死細胞染色し、その生存率を調べることにより抗ガン剤の至適濃度範囲を調べることができた。
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