がん免疫遺伝子治療の国産ウイルスベクターによる臨床開発

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14207047
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 田原 秀晃 東京大学, 医科学研究所, 教授 (70322071)
• 研究分担者: 谷 憲三郎 九州大学, 生体防御医学研究所, 教授 (00183864) ; 高山 卓也 東京大学, 医科学研究所, 助手 (10332579) ; 角田 卓也 東京大学, 医科学研究所, 講師 (30275359) ; 北村 義浩 東京大学, 医科学研究所, 助教授 (10202037)
• キーワード: 遺伝子治療 / 腫瘍免疫 / アデノウィルスベクター / IL-12 / GMP / 探索的医療 / 樹状細胞

研究概要

当研究所内に設置された治療ベクター開発室を利用して本邦独自のIL-12を用いた新規遺伝子治療臨床プロトコールを立ち上げることを目的としてさらに研究を進めた。臨床応用につながる基礎的検討としては、安全で、かつヒト樹状細胞に対して遺伝子導入効率の良いアデノウイルス・ベクターの作成を行った。ヒト樹状細胞はアデノウイルスのレセプターを有していないため、一般にアデノベクターによる遺伝子導入効率が低い。これを改善するために、アデノベクターのレセプター結合部位にRGD配列を組み込んだベクターを作成し、CAR非依存的な遺伝子導入が可能なベクターを作成した。また、この研究課題の大きな目標である、臨床研究に使用できるアデノウイルス・ベクターを米国FDA(Food and Drug Administrations)の定めるGMP(Good Manufacturing Procedure)基準にて作製することについては、さらに具体的な進展があった。つまり、臨床用ベクター液作製に際して必要不可欠であるものの本邦にはいまだ存在しないパッケージング細胞(293細胞)のMaster Cell Bank(MCB)とWorking Cell Bank(WCB)の作製である。米国より輸入された検証済み293細胞を、治療ベクター開発室にて無菌的に培養して増殖させ、十分な細胞数を持つMCBならびにWCBを作成した。これらに関して、GMP基準に基づいた検査を行ったところ、米国FDAの定めるすべての項目について十分な品質を有することが確認された。このWCBを用いて、実際に使用されるIL-12アデノウイルス・ベクターの作成が可能となった。以上に述べたように、臨床用IL-12アデノベクターの完成に向けて着実な歩みを遂げているだけではなく、この工程を通じて、臨床用ベクター作製のノウハウが蓄積されてきている。

研究成果

• [文献書誌] Hashimoto W, Tanaka F, Robbins PD, Taniguch M, Okamura H, Lotze MT, Tahara H: "NK but not NKT cells play a necessary role to promote an innate antitumor response induced by IL-18"Int J Cancer. 103. 508-513 (2003)
• [文献書誌] Numasaki M, Fukushi JI, Ono M, Narula SK, Zavodny PJ, Kudo T, Robbins PD, Tahara H, Lotze MT: "Interleukin-17 promotes angiogenesis and tumor growth."Blood. 101. 2620-2627 (2003)
• [文献書誌] Nishioka Y, Wen H, Mitani K, Robbins PD, Lotze MT, Sone S, Tahara H.: "Differential effects of IL-12 on the generation of alloreactive CTL mediated by murine and human dendritic cells : a critical role for nitric oxide."J Leukoc Biol. 73. 621-629 (2003)
• [文献書誌] Nakahara S, Tsunoda T, Baba T, Asabe S, Tahara H: "Dendritic cells stimulated with a bacterial product, OK-432, efficiently induce cytotoxic T lymphocytes specific to tumor rejection peptide."Cancer Research. 63. 4112-4118 (2003)
• [文献書誌] Higuchi N, Maruyama H, Kuroda T, Kameda S, Iino N, Kawachi H, Nishikawa Y, Hanawa H, Tahara H: "Hydrodynamics-based delivery of the viral interleukin-10 gene suppresses experimental crescentic glomerulonephritis Wistar-Kyoto rats."Gene Ther.. 10. 1297-1310 (2003)
• [文献書誌] Sato M, Takayama T, Tanaka H, Konishi J, Suzuki T, Kaiga T, Tahara H.: "Generation of Mature Dendritic Cells Ffully Capable of T Helper Type 1 Polarization Using OK-432 Combined with Prostaglandin E2"Cancer Science. 94. 1091-1098 (2003)