牛海綿状脳症病原体高感度検出系の開発

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14360175
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 小野寺 節 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (90012781)
• 研究分担者: 佐伯 圭一 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助手 (10311630) ; 松本 芳嗣 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助教授 (00173922)
• キーワード: プリオン / BSE / 牛海綿状脳症 / ウエスタン・ブロット / ELISA / RT-PCR / スクレイピー / 心臓異常

研究概要

1.米国カリフォルニア大学のプルシナー博士との共同研究により1型ノックアウトマウスの脳神経細胞を、レトロウイルスベクターによるトランスフェクションにより不死化した。
2.財団法人日本生物科学研究所との共同研究所との共同研究により、プリオンに対するモノクローナル抗体を作製した。これらのモノクローナル抗体は、日本のBSE病原体、羊スクレイピー、ヒトCJD患者材料と特異的に反応する事が免疫組織化学により明らかにされた。
3.レトロウイルスウイルスベクター不死化操作による脳細胞株は、NpL1,NpL2株は神経細胞のマーカーを有し、GpL1,GpL2はグリア細胞のマーカーを有した。
4.不死化神経細胞HpL3-4に、プリオン遺伝子部分欠損遺伝子Prnp ctmを導入すると、さらに強力なアポトーシスが観察された。これらは、プリオン病感染における細胞障害のin vitroモデルと考えられる。

研究成果

• [文献書誌] Sakudo A, Onodera T: "In pairment of superoxide dismatase activation by Nterminally trancated prion protein (PrP)"Biochem.Biopys.Res.Commun.. 308. 660-667 (2003)
• [文献書誌] Nakamura Y, Onodera T: "Transfection of prion protein gene suppres coxsackievirus B reprication"J.Gen.Virol.. 84. 3495-3502 (2003)
• [文献書誌] Hange A, Onodera T: "Alphar- and beta-cleuage of the amino terminus of the cellular prion protein"Biol Cell. (in press). (2004)
• [文献書誌] Sakudo A, Onodera T: "Absence of superoxide dismutase activity in a soluble celluar isoform of prion produced by baculovirus expression system"Biochem.Biopys.Res.Commun.. 307. 678-683 (2003)
• [文献書誌] Sakudo A, Onodera T: "Tumor necrosis factor attenuates prion protein -deficient neuronal cell death by an increase in Bcl-2 expression"Biochem.Biopys.Res.Commun.. 310. 725-729 (2003)
• [文献書誌] Kubosaki A, Onodera T: "Expression of normal cellular prion protein T lymphocytes, and effect of copperion"Biochem.Biopys.Res.Commun.. 307. 810-813 (2003)
• [文献書誌] 小野寺 節: "人と動物のプリオン病(分担執筆)"近代出版. 195 (2003)