ヒト消化器癌の増殖・進展過程におけるドーマンシー制御因子と新規関連蛋白の探索

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14370069
• 研究機関: 鳥取大学
• 研究代表者: 井藤 久雄 鳥取大学, 医学部, 教授 (60127610)
• 研究分担者: 尾崎 充彦 鳥取大学, 医学部, 助手 (40325006) ; 庄盛 浩平 鳥取大学, 医学部, 助手 (60314572) ; 守山 正胤 大分大学, 医学部, 教授 (90239707)
• キーワード: アポトーシス / 細胞増殖活性 / 腫瘍内微小血管 / 抗FAS抗体 / シグナル伝達 / RUNX3 / 胃腺種 / 胃癌

研究概要

1.抗ヒトRUNX3ポリクローナル抗体を作製し、ヒト胃癌におけるRUNX3発現解析を行った。RUNX3蛋白は胃底腺の主細胞およびガストリン産生G細胞の一部に発現していた。他方、腸上皮化生粘膜や胃癌細胞での発現は見いだされなかった。
2.抗Fas抗体による細胞内シグナル伝達を胃癌培養細胞株で検討した。MKN-45とKATO-III細胞は抗Fas抗体添加48時間後に、30〜40%がアポトーシスに陥ったが、チトクロームcの細胞質への移行、Caspase-9、-3の阻害剤でアポトーシスが阻止された。従って、胃癌細胞における抗Fas抗体誘発シグナルはミトコンドリア経路である。
3.胃粘膜内癌52例と胃腺腫70例の細胞生物学的特性を解析した。前者は後者に比較して有意に細胞増殖活性が高く、アポトーシスは少なかった。こうした現象には腫瘍内微小血管形成が関与していることが示された。また、p53遺伝子変異の関与が示唆された。
4.ヒト食道扁平上皮癌100例の解析から、癌細胞におけるcyclo-xygenase-2(Cox-2)発現は腫瘍内微小血管増生とアポトーシス抑制に関与しており、治療に関して分子標的になりうる可能性が示唆された。事実、Cox-2阻害剤はヒト悪性線維性組織球症培養細胞株の増殖を抑制した。
5.ヒト胃癌切除標本12例より癌部および非腫瘍部から抽出した蛋白を用いプロテオーム解析による発現量の異なる蛋白の同定を2次元電気泳動法で試みた。胃癌で有意に発現が亢進している蛋白11個、有意に発現が低下している蛋白9個を同定した。それらはいずれも既知の蛋白で、主に細胞周期関連蛋白、細胞内代謝に関わる蛋白およびプロテアソーム関連蛋白であった。

研究成果

• [文献書誌] Kase S, Osaki M, Adachi H, Tsujitani N, Kaibara N, Ito H: "Expresson of cyclo-oxygonase-2 is correlated with high intratumoral microvessel density and low apoptotic index in human esophageal squamous cell carcinomas"Virchows Arch. 442. 129-135 (2003)
• [文献書誌] Kase S, Osaki M, Honjo S, Adachi H, Ito H: "Tublar adenoma and intramucosal intestinal-type adenocarcinoma of the stomach : what are the pathobiological differences?"Gastric Cancer. 6. 71-79 (2003)
• [文献書誌] Adachi K, Osaki M, Kase S, Takeda A, Ito H: "Anti-Fas antiboby-induced apoptosis transduction in human gastric carcinoma cell lines"International Journal of Oncology. 23. 713-719 (2003)
• [文献書誌] Kodani I, Osaki M, Shomori K, Araki K, Goto E, Ryoke K, Ito H: "Minichromosome maintenance2 expression is correlated with mode of invasion and prognosis in oral squamous cell carcinomas"J Oral Pathol Med. 32. 468-474 (2003)
• [文献書誌] Yamashita H, Osaki M, Honjo S, Yoshida H, Teshima R, Ito H: "A selective cyclooxgenase-2 inhibitor, NS-398, inhisbits cell growth by cell cycle arrest in a human malignant fiblous histiocytoma cell line"Anticancer Res. 23. 4671-4674 (2003)