二酸化窒素様活性窒素種の心血管系組織からの発生機序とその制御に関する研究

2004 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 14370120
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 衛生学
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 荻野 景規 金沢大学, 医学系研究科, 教授 (70204104)
• 研究分担者: 神林 康弘 金沢大学, 医学系研究科, 講師 (20345630) ; 加藤 昌志 中部大学, 生命健康科学研究所, 教授 (10281073) ; 中村 裕之 高知大学, 医学部, 教授 (30231476) ; 信國 好俊 金沢大学, 医学系研究科, 講師 (80295641)
• 研究期間 (年度): 2002 – 2004
• キーワード: ペルオキシダーゼ / ニトロチロシン / 心臓 / 免疫組織化学 / 心筋梗塞 / ヘモグロビン / ミオグロビン / ミエロペルオキシダーゼ

研究概要

我々は、ラット心臓中にペルオキシダーゼ依存性チロシンニトロ化を発生させる酵素又は蛋白質の存在を、生化学的及び免疫組織学的に検討した。チロシンニトロ化の関与する蛋白質は、可溶性分画で、pH6.0で最大の活性を示した。ヒドキシアパタイト、イオン交換クロマトグラフィー等による精製により、ヘモグロビンおよびミオグロビンが関与していることが判明した。その他の蛋白質の存在も認められたが、同定にまで至らなかった。モルカット膜を用いた検討により、ミオグロビンやチトクロームcは、この目的蛋白質に関係ないことが判明した。更に、凍結切片を用い、過酸化水素、亜硝酸イオン下で反応させると、ニトロチロシン抗体に反応する染色局在を、心筋細胞に認めた。下腿横紋筋では、このような染色が認められないことより、ミオグロビンではないことが判明した。さらに、虚血-再還流により作製した心筋梗塞の凍結切片を用いチロシンニトロ化に関与する酵素の存在を検討すると、冠動脈に集積する好中球由来のペルオキシダーゼが関与することが判明した。しかしながら、固定標本及び未処理凍結切片では、梗塞部の染色局在を認めるが、冠動脈での染色は認められなかった。以上より、ヘモグロビン、ミオグロビン、チトクロームC以外にチトクロームCの分解物であるミクロペルオキシダーゼも考えられるが、分子量から否定的であり、今後、高分子量のタンパクの検討が必要である。

研究成果

• [雑誌論文] Intranasal mite allergen induces allergic asthma-like responses in NC/Nga mice. (2006)
  • 著者名/発表者名: Shibamori M, Ogino K, Kambayashi Y, Ishiyama H
  • 雑誌名: Life Sciences 78 ページ: 987-994
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Intranasal mite allergen induces allergic asthma-like responses in NC/Nga mice. (2006)
  • 著者名/発表者名: Shibamori, M., Ogino, K., Kambayashi, Y., Ishiyama, H.
  • 雑誌名: Life Sciences 78 ページ: 987-994
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Reactive nitrogen species formation in eosinophils and imbalance in nitric oxoxide metabolism are involved in atopic dermatitis-like skin lesions in NC/Nga mice. (2005)
  • 著者名/発表者名: Kubo M, Kambayashi Y, Takemoto K, Okuda J, Muto M, Ogino K
  • 雑誌名: Free Radic Res 39 ページ: 719-727
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Kinobeon A, purified from safflower's culture cells, is a novel and potent single oxygen quencher. (2005)
  • 著者名/発表者名: Kambayashi Y, Takekoshi S, Nakano M, Shibamori M, Hitomi Y, Ogino K
  • 雑誌名: Acta Bichemica Polonica 52 ページ: 903-907
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Reactive nitrogen species formation in eosinophils and imbalance in nitric oxide metabolism are involved in atopic dermatitis-like skin lesions in NC/Nga mice. (2005)
  • 著者名/発表者名: Kubo, M., Kambayashi, Y., Takemoto, K., Okuda, J., Muto, M., Ogino K.
  • 雑誌名: Free Radic.Res. 39 ページ: 719-727
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Kinobeon A, purified from safflower's culture cells, is a novel and potent singlet oxygen quencher. (2005)
  • 著者名/発表者名: Kambayashi, Y., Takekoshi, S., Nakano, M., Shibamori, M., Hitomi, Y., Ogino, K.
  • 雑誌名: Acta Bichemica Polonica 52 ページ: 903-907
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Induction of myeloperoxidase and nitrotyrosine formation in a human eosinophilic leukemia cell line, Eol-1. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kodama N, Kambaayashi Y, Kubo M, Yoneyama S, Nobukuni Y, Nakamura H, Ogino K
  • 雑誌名: Biochem Funct 22 ページ: 105-112
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Induction of myeloperoxidase and nitrotyrosine formation in a human eosinophilic leukemia cell line, EoL-1. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kodama, N., Kambayashi, Y., Kubo, M., Yoneyama, S., Nobukuni, Y., Nakamura, H., Ogino, K.
  • 雑誌名: Biochem.Funct. 22 ページ: 105-112
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Association of single nucleotide polymorphisms in the eosinophil peroxidase gene with Japanese cedar pollinosis. (2004)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, H., Higashikawa, F., Miyagawa, K., Nobukuni, Y., Endo, T., Imai, T., Ozasa, K., Motohashi, Y., Matsuzaki, I., Sasahara, S., Hatta, K., Ogino, k., Eboshida, A.
  • 雑誌名: Int.Arch.Allergy Immunol. 135 ページ: 40-43
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Reestimation of Cypridina luciferin analogues (MCLA) as a chemiluminescence probe to detect active oxygen species-cationary note for use of MCLA (2003)
  • 著者名/発表者名: Kambayashi Y, Ogino K
  • 雑誌名: J Toxicol Sci 28 ページ: 139-148
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] High contribution contrast between the genes of eosinophil peroxidase and IL-4 receptor alpha-chain in Japanese cedar pollinosis. (2003)
  • 著者名/発表者名: Nakamura H, Miyagawa K, Ogino K, Endo T, Imai T, Ozasa K, Motohashi Y, Matsuzaki I, Sasahara S, Hatta K, Eboshida A
  • 雑誌名: J Allergy Clin Immun 112 ページ: 1127-1131
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Reestimation of Cypridina luciferin analogs (MCLA) as a chemiluminescence probe to detect active oxygen species -cautionary note for use of MCLA. (2003)
  • 著者名/発表者名: Kambayashi, Y., Ogino, K.
  • 雑誌名: J.Toxicol.Sci. 28 ページ: 139-148
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] High contribution contrast between the genes of eosinophil peroxidase and IL-4 receptor alpha-chain in Japanese cedar pollinosis. (2003)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, H., Miyagawa, K., Ogino, K., Endo, T., Imai, T., Ozasa, K., Motohashi, Y., Matsuzaki, I., Sasahara, S., Hatta, K., Eboshida, A.
  • 雑誌名: J.Allergy Clin.Immun. 112 ページ: 1127-1131
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Formation of superoxide anion during ferrous ion-catalyzed decomposition of linoleic acid hydroperoxide under aerobic condition. (2003)
  • 著者名/発表者名: Kambayashi, Y., Tero-Kubota, S., Yamamoto, Y., Kato, M., Nakano, M., Yagi, K., Ogino, K.
  • 雑誌名: J.Biochem. 134 ページ: 903-909
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より