NKT細胞の新規合成糖脂質リガンドによる自己免疫疾患の治療法の開発

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14370169
• 研究機関: 国立精神・神経センター
• 研究代表者: 三宅 幸子 国立精神・神経センター, 神経研究所・免疫研究部, 室長 (50266045)
• 研究分担者: 山村 隆 国立精神・神経センター, 神経研究所・疾病研究第六部, 部長 (90231670)
• キーワード: NKT細胞 / 糖脂質 / 自己免疫疾患 / Th2サイトカイン / コラーゲン関節炎 / I型糖尿病 / 実験的自己免疫性脳脊髄炎 / ループスモデル

研究概要

NKT細胞を刺激して、Th2サイトカインを選択的に産生させることによって実験的自己免疫性脳脊髄炎(EAE)を抑制する糖脂質OCHを発見し、OCHがEAEだけでなく、コラーゲン関節炎、NODマウスにおける糖尿病などのTh1細胞が病態を悪化させる自己免疫疾患を広く抑制することを明らかにしてきた。本年度は、OCHがNKT細胞にIL-4を選択的に産生させる分子機序について解析した。
OCH、α-GCさらにスフィンゴシン鎖がα-GCとOCHの中間である合成糖脂質を比較すると、スフィンゴシン鎖が短いとNKTハイブリドーマを活性化可能な時間は短くなり、スフィンゴシン鎖の長さがCD1との結合安定性と相関した。また、IFN-γ産生能はスフィンゴシン鎖の長さと相関し、CD1との結合性安定性と比例した。セルソーターで分離したNKT細胞を、固相化抗CD3抗体を用いて時間を変えて刺激すると、IL-4産生は2時間の刺激で起こったが、IFN-γの刺激は3時間程度の刺激が必要であり、IFN-γ産生にはIL-4産生よりも長時間の刺激が必要であった。NFAT誘導阻害剤であるサイクロスポリンAを添加すると、IL-4、IFN-γ両者とも産生がみられなくなった。蛋白合成阻害剤であるサイクロヘキサミドを加えると、IFN-γのみmRNA産生が抑制されIL-4は影響がなかった。DNAマイクロアレイを用いた検討で、α-GC刺激のみで上昇がみられ、IFN-γ産生に関与することがしられている転写因子を検索すると、c-Re1がα-GC刺激で選択的に上昇していた。c-Re1のdominant negative mutantを、レトロウイルスベクターを用いて分離したNKT細胞に遺伝子導入した細胞では、刺激によるIFN-γ産生炉著しく抑制され、c-Re1がNKT細胞のIFN-γに重要な因子であることが明らかとなった。

研究成果

• [文献書誌] Koike F et al.: "Microarray analysis identifies interferon β-regulated genes in multiple sclerosis."J.Neuroimmunol.. 139(1-2). 109-118 (2003)
• [文献書誌] Bedoui S et al.: "Neuropeptide Y (NPY) suppresses experimental autoimmune encephalomyelitis : NPY Y1 receptor-specific inhibition of autoreactive Th1 responsese in vivo."J.Immunol.. 171(7). 3451-3458 (2003)
• [文献書誌] Nakamura T et al.: "CD4+ NKT cells, but not conventional CD43+ T cells, are required to generate efferent CD8+ T regulatory cells following antigen inoculation in an immune-privileged site."J.Immunol.. 171(3). 1266-1271 (2003)
• [文献書誌] Stanic AK et al.: "Another view of T cell antigen recognition : cooperative engagement of glycolipid antigens by Vα14Jα18 natural TCR."J.Immunol.. 171(9). 4539-4551 (2003)
• [文献書誌] Chiba A et al.: "Natural killer T cell activation by OCH, a sphingosine truncated analogue of alpha-galactosylceramide, suppresses collagen-induced arthritis."Arthritis Rheum.. 50(1). 305-313 (2004)
• [文献書誌] Yamamura T et al.: "Synthetic glycolipids as potential therapeutics for autoimmune disease."Curr.Topics.Medic.Chem.. 4(5). 561-567 (2004)
• [文献書誌] 三宅幸子 他: "NKT細胞合成糖脂質リガンドによる関節炎の治療"臨床免疫. 40(1). 61-65 (2003)
• [文献書誌] 三宅幸子: "神経ペプチドと自己免疫疾患"Brain Medical. 15(4). 27-32 (2003)
• [文献書誌] 山村隆 他: "多発性硬化症の進行を抑制する免疫細胞"Brain Medical. 15(4). 55-59 (2003)
• [文献書誌] 三宅幸子: "NKT細胞と自己免疫疾患"内科. 93(2). 213-216 (2004)
• [文献書誌] 三宅幸子: "免疫制御細胞と自己免疫疾患"Mol.Med.. 41(2). 177-182 (2004)
• [文献書誌] 三宅幸子: "ナチュラルキラーT細胞を標的とした糖脂質による多発性硬化症の分子治療"医学のあゆみ. 208(5). 449-453 (2004)
• [文献書誌] 三宅幸子 他: "Annual Review 免疫2003"中外医学社. 7 (2003)
• [文献書誌] 三宅幸子: "Annual Review 神経2004"中外医学社. 7 (2004)