大腸ACFにおけるK-ras変異の意義と同分子を標的とした大腸癌予防の試み

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14370187
• 研究機関: 札幌医科大学
• 研究代表者: 新津 洋司郎 札幌医科大学, 医学部, 教授 (10045502)
• 研究分担者: 加藤 淳二 札幌医科大学, 医学部, 助教授 (20244345) ; 高山 哲治 札幌医科大学, 医学部, 講師 (10284994)
• キーワード: 大腸癌 / K-ras / 阻害剤

研究概要

1.目的
ras蛋白の阻害剤であるFarnesyltransferase阻害剤(FTI,各種CAAX analogue)やGeranylgeranyltransefrase阻害剤(GGTI)を用いて、大腸腺腫の前病変であるACF、腺腫及び癌の形成を抑制するかどうかを動物化学発癌モデルを用いて検討した。
2.方法と結果
(1)ラット大腸発癌モデルとACFにおけるK-ras変異の解析
ラットに大腸発癌物質であるDimethyhydralazine(DMH)(15mg/kg×2)を皮下注射し、8週後に屠殺して全大腸をメチレンブルーで染色し、実体顕微鏡下にACFを観察した。ACF組織を切離し、DNAを抽出して2-step PCR法によりK-ras変異の有無を検討したところ、66%に変異が認められた。
(2)各種FTI及びGGTI
FTIとして、K-ras蛋白C末端のペプチド配列の誘導体CAAX analogueの中で特に変異K-rasに対する抑制効果の高いFTI276を用いた。GGTIとして、GGTI297を用いた。
(3)各種FTIのACFに対する抑制効果
上記のラット大腸発癌モデルにおいて、各種FTIを連日投与し、8週後にACF数を検討したところ、ACF数は有意に抑制された。FTIをday1-day28に投与した群とday29-day56に投与した群では、後者の方が有意にACF数が抑制された。
(4)各種GGTIのACFに対する抑制効果
上記のラット大腸発癌モデルにおいて、各種GGTIを連日投与し、8週後にACF数を検討したところ、ACF数は抑制傾向が認められたが、有意差は認められなかった。
3.結論
変異ras蛋白を阻害するFTIはACFの形成を有意に抑制すること、またGGTIはACFの形成を抑制する傾向を有することが認められ、これらの阻害剤の発癌予防効果が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Takayama T, Niitsu Y, et al.: "Ananlysis of K-ras, APC and β-catenin in aberrnt crypt foci in patients with adenorma and cancer, and familial adenomatous polyposis"Gastroenterology. 121. 599-611 (2001)
• [文献書誌] Miyanishi K, Takayama T, Niitsu Y, et al.: "Glutathione transferase-π overexpression is closely associated with K-ras mutation during human colon carcinogenesis"Gastroenterology. 121. 865-874 (2001)
• [文献書誌] Kato J, Takayama T, Niitsu Y et al.: "Normalization of elevated hepatic 8-hydroxy-2' Deoxyguanosine levels in chronic hepatitis C patients by phrebotomy and low iron diet"Cancer Reserch. 61. 8697-8702 (2001)
• [文献書誌] Kato J, Niitsu Y, et al.: "Ratio of transferrin (Tf) to Tf-receptor complex in circulation differs depending on Tf iron saturation"Clin Chem.. 48. 181-183 (2002)