| 研究概要 |
Methylated CpG island amplification/representative difference assay(MCA/RDA)法を用いてATL細胞で低メチル化されている遺伝子としてMEL1Sを同定した。PRドメインを有するMEL1と欠くMEL1Sの2つのaltenative splicing formがあるがATL細胞ではMEL1Sが発現していた。このMEL1Sのプロモーター領域を5'-RACE法を用いてエクソン4の上流にputative exonと共に同定した。ATL細胞では、このMEL1S遺伝子のプロモーター領域は低メチル化でありMEL1遺伝子のプロモーター領域は高メチル化であった。MEL1S発現の意義を検討するためにマウスT細胞株であるCTLL-2にMEL1,MEL1S発現ベクターをトランスフェクトしたところMEL1はTGF-βに対する感受性を増加させたのに対してMEL1Sは抵抗性を賦与した。従ってMEL1Sの発現はATL細胞におけるTGF-β抵抗性に関連しているものと考えられる。
一方、高メチル化により発現が抑制される遺伝子としてKLF4,EGR3遺伝子を含む7つの遺伝子を同定した。KLF4,EGR3遺伝子を発現するアデノウイルスベクターに作成しATLへ感染させたところ、アポトーシスを誘導した。EGR3はFas ligandの転写を誘導することで細胞死を誘導していることが確認された。
慢性リンパ性白血病(CLL)細胞とCD19陽性Bリンパ球を用いてMCA/RDA法でメチル化異常の領域を単離した。高メチル化遺伝子は3種類しか確認できなかったが、低メチル化遺伝子を多数、単離し解析を進めている。
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