自己骨髄間質細胞を使用する再生医工学による再生心臓弁、再生血管の開発、応用

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14370418
• 研究機関: 東京女子医科大学
• 研究代表者: 新岡 俊治 東京女子医科大学, 医学部, 講師 (20192122)
• 研究分担者: 磯松 幸尚 東京女子医科大学, 医学部, 助手 (80211051) ; 青木 満 東京女子医科大学, 医学部, 講師 (80175736) ; 黒澤 博身 東京女子医科大学, 医学部, 教授 (50075511)
• キーワード: 自己骨髄細胞 / 幹細胞 / 内皮細胞 / ティッシュエンジニアリング / 再生血管

研究概要

動物実験による至適骨髄細胞数、至適脱細胞化の探究及び選定を行った。実験動物として子犬を用い、骨髄細胞の採取は通常の骨髄穿刺針を用いて行った。幹細胞のマーカーとしてCD34^+細胞を用い、採取血液中の白血球数と採取血液の重量の積を、血液比重の1.05で除して、総採取細胞数を求めた。この総採取細胞数にCD34^+細胞陽性率を乗したものが採取できたCD34^+細胞数である。体重1kg当たりのCD34^+細胞数が2X10^6を超えていれば十分量の幹細胞が採取できたと考えられた。十分な細胞数が得られれば、脱細胞化同種組織の導管(8x10mm)に播種した。2-3時間後に細胞を採取した同一動物を全身麻酔下に左開胸し、肺門部から心膜飜転部までの末梢肺動脈をこのティッシュエンジニアリングで作成した導管で置換する。コントロール実験として組織断片を播種しない同種血管組織の移植も行う予定である。移植3-12ヶ月後に作成された組織に対して生化学的、生力学的、免疫組織学的検討を行う予定である。生化学検査として、組織中コラーゲン、エラスチン、カルシウム濃度の測定を行い、インストロン張力検査機を用いて作成された組織の最大張力を測定し自己の同じ部位の組織と比較検討する。組織学的には免疫染色の手法を用いて内皮細胞の指標である第8因子を染色すると共に細胞間隙の間質蛋白質を染色し自己組織と比較検討する。同種細胞(allogenic)を使用した場合は原則的には拒絶反応の因子を排除できないため、細胞は全て自己(autologous)細胞を用いた。

研究成果

• [文献書誌] T.Shinoka: "Tissue Engineered Heart Valves : Autologous Cell Seeding on Biodegradable Polymer Scaffold"Artificial Organ. 26. 522-526 (2002)
• [文献書誌] Naito Y, Imai Y, Shin'oka T, Aoki M, Kashiwagi, Konuma T, Kurosawa H.: "A Successful Clinical Application of Tissue Engineered Graft for Extracardiac Fontan Operation"Journal of Thoracic & Cardiovascular Surgery. 125. 419-420 (2002)
• [文献書誌] T.Hiramatsu, Y.Imai, H.Kurosawa, Y.Takanashi, M.Aoki, T.Shin'oka: "Effects of dilutional and modified ultrafiltration in plasma endothelin-1 and pulmonary vascular resistance after the fontan procedure"Ann Thorac Surg. 73. 862-865 (2002)
• [文献書誌] Kashiwagi J, Imai Y, Aoki M, Shin'oka T, Hagino I, Nakazawa M: "An arterial switch operation for a concordant crisscross heart with the complete transposition of the great arteries"Journal of Thoracic & Cardiovascular Surgery. 124. 176-178 (2002)
• [文献書誌] T.Hiramatsu, Y.Imai, H.Kurosawa, Y.Takanashi, M.Aoki, T.Shin'oka: "Midterm results of surgical treatment of systemic ventricular outflow obstruction in Fontan Patients"Ann Thorac Surg. 73. 1282-1285 (2002)