アルキル化ピロールイミダゾールポリアミドによる腎癌血管新生抑制法の開発

2004 年度 研究成果報告書概要

• 研究課題/領域番号: 14370505
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 泌尿器科学
• 研究機関: 東京医科歯科大学
• 研究代表者: 影山 幸雄 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助教授 (10211153)
• 研究分担者: 杉山 弘 京都大学, 大学院・理学研究科, 教授 (50183843) ; 木原 和徳 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (40161541)
• 研究期間 (年度): 2002 – 2004
• キーワード: ポリアミド / 腎臓癌 / HIF / VEGF / 血管新生

研究概要

腎臓癌の血管新生に関わっていると考えられている低酸素応答転写因子(Hypoxia inducible factor : HIF)のDNA結合配列(Hypoxia responsive element : HRE)を特異的に認識するピロールイミダゾールポリアミド3種類を設計、合成して血管内皮成長因子(VEGF)の転写が抑制できるかどうかを検討した。VEGFのHREを組み込んだレポータープラスミドを用いたLuciferase assayによる解析では3種類のポリアミドの投与によりHIFによるVEGFプロモーター転写活性誘導が濃度依存性に抑制された。ポリアミド単独投与よりも3種類のポリアミドを混合投与した場合のほうが転写の抑制は顕著な傾向がみられた。HIFの活性が亢進しているヒト腎臓癌細胞A498を用い、上記のポリアミドが実際にVEGFの転写を抑制できるかどうかを検討した。Real time RT-PCRによるmRNAの定量解析にて72時間のポリアミド暴露によりVEGF mRNAは約50%抑制された。蛋白レベルでの抑制を確認するためELISAにてA498細胞の培養上清中のVEGF濃度を測定した。培養上清中VEGF濃度もVEGF mRNAの低下に一致して72時間のポリアミド投与により約50%抑制されることが確認された。複数のピロールイミダゾールポリアミドの投与により腎臓癌血管新生の主要因子であるVEGFの産生を抑制できる可能性が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Prognostic significance of endothelial per-arnt-sim domain protein 1/hypoxia-inducible factor-2a expression in a subset of tumor associated macrophages in invasive bladder cancer. (2004)
  • 著者名/発表者名: Koga F, Kageyama Y, Kawakami S, Fujii Y, Hyochi N, Ando N, Takizawa T, Saito K, Iwai A, Masuda H, Kihara K.
  • 雑誌名: J Urol 171 ページ: 1080-1084
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Leu-574 of human HIF-1a is a molecular determinant of prolyl hydroxylation. (2004)
  • 著者名/発表者名: Kageyama Y, Koshiji M, To KKW, Tian YM, Ratcliffe PJ, Huang LE.
  • 雑誌名: FASEB J 18 ページ: 1028-1030
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] HIF-1alpha induces cell cycle arrest by functionally counteracting Myc. (2004)
  • 著者名/発表者名: Koshiji M, Kageyama Y, Pete EA, Horikawa I, Barrett JC, Huang LE.
  • 雑誌名: EMBO J 23 ページ: 1949-1956
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] HIF-1alpha induces cell cycle arrest by functionally counteracting Myc. (2004)
  • 著者名/発表者名: Koshiji M, Kageyama Y, Pete EA, Horikawa I, Barrett JC, Huang LE.
  • 雑誌名: EMBO J. 23 ページ: 1949-1956
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より
• [雑誌論文] Positive expression of HIF-2a/EPAS1 in invasive bladder cancer. (2002)
  • 著者名/発表者名: Xia G, Kageyama Y, Hayashi T, Hyochi N, Kawakami S, Kihara K
  • 雑誌名: Urology 59 ページ: 774-778
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] 腎尿路腫瘍と低酸素応答転写因子 (2002)
  • 著者名/発表者名: 影山幸雄
  • 雑誌名: 泌尿器外科 15 ページ: 447-448
  • 説明: 「研究成果報告書概要(和文)」より
• [雑誌論文] Positive expression of HIF-2a/EPAS1 in invasive bladder cancer. (2002)
  • 著者名/発表者名: Xia G, Kageyama Y, Hayashi T, Hyochi N, Kawakami S, Kihara K.
  • 雑誌名: Urology 59 ページ: 774-778
  • 説明: 「研究成果報告書概要(欧文)」より