絨毛外トロホブラストの接着、血管新生因子発現とアポトーシスの局所・内分泌調節

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14370533
• 研究機関: 神戸大学
• 研究代表者: 丸尾 猛 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (60135811)
• 研究分担者: 佐藤 朝臣 神戸大学, 医学部附属病院, 助手 (90314484) ; 武木田 茂樹 神戸大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (60324927) ; 松尾 博哉 神戸大学, 医学部, 教授 (60229432)
• キーワード: 絨毛外トロホブラスト / 甲状腺ホルモン / 初代分離培養細胞 / 細胞接着関連因子 / インテグリン / マトリックスメタロプロテイナーゼ / フィブロネクチン / マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害因子

研究概要

絨毛細胞のモデルとなる絨毛癌(JAr)細胞株を用いて、adrenomedullinのJAr細胞における生物学的意義について研究を行い、JAr細胞はadrenomedullinを合成・分泌することをmRNAレベルならびに蛋白レベルで確認した。さらに[^<125>I]で標識したadrenomedullinとJAr細胞との結合能を検討したところ、JAr細胞はadrenomedullinの特異的な受容体を有することを確認した。絨毛cytotrophoblastのモデルとなるJAr細胞でadrenomedullinの特異的受容体の存在が確認されたことより、adrenomedullinがautocrine/paracrine機構を介して絨毛細胞の増殖・分化に関与する可能性が示唆された。
さらに、甲状腺ホルモンが絨毛外トロホブラスト(EVTs)に与える影響について培養細胞系を用いて検討した。細胞・細胞基質接着関連分子であるintegrin α5β1、oncofetal fibronectin(FFN)、細胞外基質の分解酵素であるmatrix metalloproteinase(MMPs)、およびMMPsの活性を調節するMMPs阻害因子(TIMPs)に注目し、fibronectin coating dishを用いた妊娠初期EVTの初代分離培養系に甲状腺ホルモンを添加し、添加後48時間後の細胞内mRNA発現をRT-PCR法、細胞内蛋白発現を免疫組織学的手法により解析した。その結果、培養EVT細胞においてintegrin α5β1、FFN、MMP2、MMP3およびTIMP1のmRNA発現が認められた。甲状腺ホルモン(T3 10-8M)添加により、integrin α5β1、FFN、MMP2、MMP3のmRNA発現が有意に増加することを認めた。免疫組織学的検討により、MMP2、MMP3およびTIMP1のトロホブラストでの局在が観察され、甲状腺ホルモン添加によりMMP2およびMMP3の発現が大きく増加することを認めた。以上の成績から、生理的濃度の甲状腺ホルモン(10-8MT_3)は妊娠初期絨毛外トロホブラストの細胞接着関連分子の発現増強を介して、脱落膜への絨毛外トロホブラストの侵入を促進させ、妊娠の維持機構に寄与することが示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Laoag-Fernandez, JB, Maruo T, Pakarinen P, Spitz IM, Johanssen E: "Effects of levonorgestrel-releasing intrauterine system on the expression of vascular endothelial growth factor and adrenomedullin in the endometrium in adenomyosis"Human Reproduction. 18. 694-699 (2003)
• [文献書誌] Motoyama S, Laoag-Fernandez JB, Mochizuki S, Yamabe S, Maruo T: "Vaginoplasty with interceed absorbable adhesion barrier for complete squamous epithelialization in vaginal agenesis"American Journal of Obstetrics and Gynecology. 188. 1260-1264 (2003)
• [文献書誌] Murakoshi H, Matsuo H, Laoag-Fernandez JB, Samoto T, Maruo T: "Expression of Fas-Fas ligand, Bcl-2 protein and apoptosis in extravillous trophoblast along invasion to the deciduas in human term placenta"Endocrine Journal. 50. 199-207 (2003)