2003 年度実績報告書

細胞増殖シグナル伝達・異常と口腔扁平上皮癌

研究課題

研究課題/領域番号	14370579
研究機関	東京医科歯科大学
研究代表者	土田信夫東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (60089951)
研究分担者	中島琢磨東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 助教授 (90256678) 小村健東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (10334434) 天笠光雄東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (00014332)
キーワード	口腔癌 / ERK / EGFR / Naf1 / 変異 / microarray / シグナル伝達 / Snt2
研究概要	口腔癌細胞株(OSCC)でEGFRからERKへの細胞増殖シグナルとAKTへ至る抗細胞死シグナルのリン酸化を介してのシグナル伝達に異常の機構解明を目的として研究を行なった。1、EGFRを中心とする細胞増殖シグナル伝達の異常の機構:OSCCで構成的にERKが活性化している細胞株のうち(a)EGFR増幅の3株でERK、AKTへのシグナル伝達に必要なEGFRの845,1068番目アミノ酸のリン酸化が構成的に活性化されて、1株でERKの脱リン酸化酵素MKP1の発現が抑制され、1株では、CDドメインにグルタミン酸(E)からリジン(K)の変異が同定されしかも増幅していた。このCDドメイン変異は既報のように他の蛋白質との結合が減弱し、電気泳動移動度の早い蛋白質であった。つまり変異ERKによりMKPが活性化し野生型ERKは脱リン酸化されるが変異型は脱リン酸化されないため構成的に活性化していることを示唆する結果を得た。2.抗癌剤感受性と遺伝子発現/microarray解析:各種OSCC細胞株のetoposide感受性をMTT法で調べ、感受性の高いOSCC細胞株と低い株でのmRNAへの発現の違いを解析した。35のdrug-resistantに関連遺伝子の発現に違いは見出されなかったがetoposideで誘導される遺伝子EI24(pig8)の発現レベルと感受性に相関がみられた。なおOSCCのetoposideに対する感受性とAKT473,308リン酸化とには関連は見い出されなかった。3.新たなERK2結合蛋白質:HIVのNef蛋白質と結合する蛋白質としてNaf1とSNT2を同定し解析した。ERK2はNaf1のC-末端領域に結合し、この領域のみを過剰発現させるとTSAによるアポトーシス誘導が促進され、細胞周期のM期に超リン酸化されることから、Naf1はM期の制御に関連する可能性が示された。一方SNT2はNaf1同様、ERK2の核へのシグナル伝達を負に制御し、Grb2結合部位の一部と考えられるアミノ酸186-252の領域が結合に携わる事等が示された、従ってSNT2はEGFRのアダプター蛋白質であるGrb2を介してERKの活性を制御する可能性がある。なお14症例の口腔癌組織より蛋白質を抽出したがシグナル伝達については検討中である。

研究成果
(5件)

すべてその他

すべて文献書誌 (5件)

[文献書誌] Ren S, Gao CF, Zhang L, Koike K, Tsuchida N: "PI3K inhibitors changed the p53-induced response of Saos-2 cells from growth arrest to apoptosis"Biochemical and Biophysical Research Communications. 308・1. 120-125 (2003)
[文献書誌] Wiswanathan M, Tsuchida N, Shanmugam G: "romoter hypermethylation profile of tumor-associated genes p16,p15,hMLH1,MGMT and E-cadherin in oral squamous cell carcinoma"Int.J Cancer. 105・1. 41-46 (2003)
[文献書誌] Hasebe A, Yoshimura, Tsuchida N, Shibata KI: "Biological activities of Bacterioides forsythus lipoproteins and therir possible roles in periodontal disease"Infection and Immunity. 72・3. 1318-1325 (2004)
[文献書誌] Zhang, Tsuchida他: "Amplification and identification of a new mutation of ERK2 in an oral squamous cell carcinoma cell lines"歯科基礎医学会誌補. 45・5. 282 (2003)
[文献書誌] Arvind, Tsuchida他: "Ientification of Naf1 and SNT2, new ERK2 binding proteins"歯科基礎医学会誌補. 45・5. 275 (2003)

2003 年度 実績報告書

細胞増殖シグナル伝達・異常と口腔扁平上皮癌

研究代表者

土田 信夫 東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (60089951)

研究成果

[文献書誌] Ren S, Gao CF, Zhang L, Koike K, Tsuchida N: "PI3K inhibitors changed the p53-induced response of Saos-2 cells from growth arrest to apoptosis"Biochemical and Biophysical Research Communications. 308・1. 120-125 (2003)

[文献書誌] Wiswanathan M, Tsuchida N, Shanmugam G: "romoter hypermethylation profile of tumor-associated genes p16,p15,hMLH1,MGMT and E-cadherin in oral squamous cell carcinoma"Int.J Cancer. 105・1. 41-46 (2003)

[文献書誌] Hasebe A, Yoshimura, Tsuchida N, Shibata KI: "Biological activities of Bacterioides forsythus lipoproteins and therir possible roles in periodontal disease"Infection and Immunity. 72・3. 1318-1325 (2004)

[文献書誌] Zhang, Tsuchida他: "Amplification and identification of a new mutation of ERK2 in an oral squamous cell carcinoma cell lines"歯科基礎医学会誌補. 45・5. 282 (2003)

[文献書誌] Arvind, Tsuchida他: "Ientification of Naf1 and SNT2, new ERK2 binding proteins"歯科基礎医学会誌補. 45・5. 275 (2003)

2003 年度実績報告書

土田信夫東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (60089951)