| 研究概要 |
本研究の目的は直接覆髄材料として日常臨床で用いられている4-META/MMA-TBBresin(スーパーボンドC&B,サンメディカル社)の溶出成分が培養細胞への増殖・分化機能にどのような影響を及ぼすかを調べることにあるが、本年度の研究結果として以下のことが判明した。
4-META/MMA-TBBresinをテフロンシート上で常温重合させてレジンプレートを作成した。作成したレジンプレート上でラット歯髄細胞(RPC細胞)を培養し以下の実験(1)から(4)を行った。実験のコントロールとして通常の細胞培養に用いられるプラスチック製のプレート上で培養後に各測定を行った。
(1)DNA量の測定:レジンプレート上でRPC細胞を培養しHoechst33342を用いてDNA量を測定した。
(2)アルカリフォスファターゼ活性測定:レジンプレート上でRPC細胞を培養しアルカリフォスファテストワコーBを用いてアルカリフォスファターゼ活性を測定した。
(3)細胞毒性試験:濃度の異なるモノマー・キャタリスト反応液を細胞培地に混合し、RPC細胞および、ヒト前骨髄性白血病細胞(HL-60細胞)に作用させた後、生細胞の割合を測定した。
(4)mRNA発現分析:レジンプレート上でRPC細胞を培養後、RNAを抽出し、RT-PCR分析を行った。
実験(1)、(2)では実験群とコントロール群で有意差は認めなかった。
実験(3)では生細胞割合が、モノマー・キャタリスト反応液の濃度依存性に推移し、RPC細胞では反応液濃度0.1%以上、HL-60細胞では1%以上の群で有意に小さかった。
実験(4)では実験群とコントロール群のBMP2、ALP、Coll(1)、OCのmRNA発現で同様の結果が得られた。
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