研究課題
骨格筋細胞内においては、筋細胞内膜系とCa^<2+>チャンネルはCa^<2+> release Units (CRUs)を形成し、興奮収縮連関の機能を制御している。本年度は、異なる発生段階のdyspedicマウス骨格筋細胞を対象として、CRUsの形態的特徴を組織化学的手法により検討し、RyR1の存在がCRUsの形成に及ぼす影響について検討した。実験動物には、異なる発育段階のdyspedicマウス並びに同腹のnoramlマウスを用いた。Dyspedicマウスの筋細胞は通常のマウスの骨格筋細胞に比較して極めて未成熟であり、中央核を持つ筋細胞が数多く観察された。また、CRUsの数も有意に少なく、筋細胞内膜系が未成熟であるのが観察された。DyspedicマウスのCRUsの多くは、dyadであり、発現比率は通常の骨格筋細胞の約2倍であった。T-SR terminal cisternae間の距離も有意に短く、その距離はRyR1のfeet構造の存在によって決定されていると推察される。Freeze-fracture法を用いたの観察では、dyspedicマウスの骨格筋細胞にtetradは観察されなかった。α1DHPR抗体を用いた免疫組織化学染色では、DHPR並びにtriadinの発現が通常の骨格筋細胞と同様に観察された。RyR1が存在しない条件下ではDHPRはtetradを形成しないものと考えられる。骨格筋型RyRは骨格筋が収縮する際にCa^<2+>放出チャンネルとして機能し、興奮収縮連関の機構を制御していることが確認された。また、dyspedicマウス骨格筋のperipheral couplingにはtetradが観察されないことから、骨格筋型の興奮収縮連関発現の必須因子の一つであるDHPRのtetrad形成にはRyR1の直接的(あるいは間接的)関与が必要であることが明らかとなった。
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