マウスの生殖細胞を起源とする奇形腫形成機構の解析

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 14380381
• 研究機関: 静岡大学
• 研究代表者: 野口 基子 静岡大学, 理学部, 助教授 (40021951)
• 研究分担者: 徳元 俊伸 静岡大学, 理学部, 講師 (30273163) ; 木村 透 大阪大学, 微生物病研究所, 助教授 (50280962) ; 野崎 正美 大阪大学, 微生物病研究所, 助教授 (30189394)
• キーワード: マウス / 始原生殖細胞 / 精巣性奇形腫(テラトーマ) / 奇形腫原因遺伝子 / マッピング / 精子形成 / 遺伝子改変マウス / PTEN

研究概要

マウスの生殖細胞を起源とする精巣性奇形腫(テラトーマ)の形成の仕組みについて,つぎの成果を得た.
1.始原生殖細胞(PGC)を起源とする実験的精巣性テラトーマの原因遺伝子を網羅的マッピングするために,形成率の高い系統と形成率ゼロの系統のF2胎仔における実験的奇形腫の有無と市販或いは新たに設計したマイクロサテライトDNAマップマーカーの系統多型との連鎖解析を行い,ett-1と命名した形成遺伝子候補領域を得た.
2.129系のterホモ型雄に自発性精巣性テラトーマを高率に発症する生殖細胞欠損遺伝子terのファインマッピングを進めた.
3.癌抑制遺伝子PTENのPGC特異的欠損マウスは精巣性テラトーマを発症し,また一部の雌は卵巣性テラトーマを発症した.そこで卵細胞特異的PTEN欠損マウスを作製したが,卵巣性テラトーマは全く発症しなかった.この結果は,PGC特異的PTEN欠損マウスでは,従来知られている卵の単為発生に起因する卵巣性テラトーマとは別のメカニズムで,卵巣性テラトーマが発症することを示唆した.
4.生殖細胞起源のテラトーマ形成の対照として,正常な精子形成細胞の遺伝子の特徴を調べた.同細胞に特異的遺伝子Oxct2a及びOxct2bはイントロンレスであり,イントロンを持つ体細胞型Oxctから生じ,マウスとヒトで96%以上の相同性を保っていた.雄性生殖細胞は本来プロモーターでない配列からでも転写できることが判明した.半数体精細胞特異的Tact1遺伝子はイントロンレスであり,発現には遺伝子内部のCpGアイランドの脱メチル化が必要であった.また,生体生殖細胞遺伝子導入法のプロモーターアッセイ系を確立し,TATA-boxなどの基本転写の複合体形成初期過程に必須なエレメントを持たないプロモーターや転写開始点下流プロモーターなど,精細胞特異的なプロモーターを同定した.

研究成果

• [文献書誌] Kuramochi-Miyagawa S: "Mili, a mammalian member of piwi family gene, is essential for spermatogenesis"Development. 131(4). 839-849 (2004)
• [文献書誌] Okamura D: "Cadherin-mediated cell interaction regulate germ cell determination in mice"Development. 130(26). 6423-6430 (2003)
• [文献書誌] Masuhara M.: "Enhanced degradation of MDM2 by a nuclear envelope component, mouse germ cell-less"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 308(4). 927-932 (2003)
• [文献書誌] Kimura T: "Conditional loss of PTEN leads to testicular teratoma and enhances embryonic germ cell production"Development. 130(8). 1691-1700 (2003)
• [文献書誌] Kimura T: "Mouse germ cell-less as an essential component for nuclear integrity"Mol.Cell.Biol.. 23(4). 1304-1315 (2003)
• [文献書誌] Hisano, M.: "Genomic structure and promoter activity of the testis haploid germ cell-specific intronless genes Tact1 and Tact2"Mol.Reprod.Dev.. 65(2). 148-156 (2003)
• [文献書誌] Yamazaki, Y: "Transcriptional regulation of the cytosolic chaperonin q subunit gene, Cctq, by Ets domain transcription factors Elk-1, Sap-1a, and Net in the absence of serum response factor"J.Biol.Chem.. 278(33). 30642-30651 (2003)
• [文献書誌] Hisano, M.: "Methylation of CpG dinucleotides in the open reading frame of a testicular germ cell-specific intronless gene, Tact1/Actl7b, represses its expression in somatic cells"Nucleic Acids Res.. 31(16). 4797-4804 (2003)
• [文献書誌] Tani, H.: "In vitro and in vivo gene delivery by recombinant baculovisuses"J.Virol.. 77(18). 9799-9808 (2003)
• [文献書誌] Ike, A.: "Transient expression analysis of the mouse ornithine decarboxylase antizyme haploid-specific promoter using in vivo electroporation"FEBS Lett.. 559. 159-164 (2004)
• [文献書誌] Onishi, M.: "Gene structure and evolution of testicular haploid germ cell-specific genes, Oxct2a and Oxct2b"Genomics I. 83(4)(In press).