| 研究概要 |
肥満細胞はIgE抗体を介し即時型或いは遅延型アレルギー反応のエフェクター細胞として機能することは周知である。我々は,既にこの細胞が多分化能造血幹細胞に由来する血液細胞の一種であることを明らかにしてきたが,炎症に応答して末梢血中を流れる肥満細胞の前駆細胞がどのような分子シグナルを内皮細胞から得て,続いてどのような機構に基づいて血管壁を通過し、結合組織内で増殖・分化するのか,さらに活性化肥満細胞の脱分化に伴う再増殖・分化過程での組織内遊走機構などは全く不明のままであった。本研究の目的は細胞外マトリックス分解酵素(MMP-9)に焦点をあて,肥満細胞の組織内分布過程における分子シグナルとその制御機構を解明することにある。本年度は以下の研究成果を得た。
1)ヒトおよびマウスの皮膚より肥満細胞を分離する方法を確立した。これによって得られた肥満細胞の増殖誘導に成功した。
2)肥満細胞前駆細胞の血管内皮細胞の接着と侵入プロセスにおける細胞接着分子の関与とMMP-9の産生を検証するための三種細胞培養システムの確立を試みた。即ち,3T3線維芽細胞に分離内皮細胞を重層培養し,得られた疑似末梢組織上に肥満細胞前駆細胞を重層し,内皮細胞への接着と内皮細胞通過と線維芽細胞間への侵入実験を行ない,肥満細胞前駆細胞を遊走させることに成功した。
3)喘息モデルマウスを作成し,気管支洗浄液中にMMP活性が存在することをザイモグラフィー法によって検出した。
以上,in vitroにおける三種細胞培養系を確立することに成功したので,引き続き肥満細胞前駆細胞の侵入シグナルとMMPの関係を明らかにする予定である。また,喘息のみならず接触性皮膚過敏症病態における,MMP群の産生状態を生化学的手法,免疫酵素抗体法,ノザンブロット分析法を駆使して,検証する。
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