| 研究課題/領域番号 |
14550782
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| 研究機関 | 広島大学 |
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研究代表者 |
廣川 健 広島大学, 大学院・工学研究科, 教授 (30116652)
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| 研究分担者 |
伊藤 一明 近畿大学, 工学部, 助教授 (80151497)
育田 夏樹 広島大学, 大学院・工学研究科, 助手 (00274118)
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| キーワード | キャピラリー電気泳動法 / マイクロチップ電気泳動法 / オンライン前濃縮 / 過渡的等速電気泳動 / 高感度・高精度分析 |
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| 研究概要 |
キャピラリーゾーン電気泳動(CZE)およびマイクロチップ電気泳動分析(MCE)の高精度化・高感度化のため、電気的注入を併用する過渡的等速電気泳動オンライン前濃縮についてシミュレーンョンおよび実験の両面から検討し、本法が極めて有効な方法であることを明らかにし、Electrokinetic supercharging(EKS)と名付けた。EKS実験条件の最適化にあたってはシミュレーションの結果が有効に利用でき、過渡的等速電気泳動前濃縮に用いる電解液条件の選択(リーディング液・ターミナル液の種類、pH、錯形成剤の有無)および充填すべきリーディング液およびターミナル液の物質量を試料濃度に応じて適切に選択することが、過渡的等速電気泳動前濃縮を効果的に機能させるために最も重要である事が明らかになった。また電気浸透流(EOF)薄試料の電気的注入には不利であり、濃度感度の向上を目的とするには可能な限りEOFを抑制すべきであることが明らかになった。このようなシミュレーションによる予備的知見を実験で確認しながら研究を進めた結果、EKS-CZEでの検出濃度下限(LOD)はアルカリ金属・希土類イオン等について間接UV吸収法によりサブppbレベルを達成し、ICやICP-AESに比肩できる濃度感度を再現性良く高精度に達成することができた。我々の提案した前濃縮法は河川水などのようなイオン強度の低い試料だけでなく、海水のような高塩濃度試料にも適用できる。このことを海水中ヨウ化物イオンの分析を例として示した。また本法はMCEにも適用可能である事を明らかにし、EKS-MCEを用いるとDNA断片やタンパク質の分析において通常行われているpinched injection法に比較して20倍以上の高感度化を達成した。これらの時果はJ.Chromatogr.やElectrophoresis誌に投稿し高い評価を得ている。
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