2003 年度実績報告書

乳癌におけるHIV-EP2遺伝子異常の解析

研究課題

研究課題/領域番号	14570165
研究機関	順天堂大学
研究代表者	藤井博昭順天堂大学, 医学部, 講師 (50296836)
キーワード	HIV-EP2 / breast cancer / loss of heterozygosity(LOH) / real-time PCR / down-regulation / 5'-RACE / methylation / alternative splicing
研究概要	目的:HIV-EP2は免疫反応や細胞増殖調節に関与すると想定されている転写因子をコードする遺伝子であるが、発癌における異常についての報告はない。今回、乳癌においてLOH頻度の高い染色体領域6q23-q24に位置する遺伝子HIV-EP2の遺伝子異常を検索した。方法:乳癌33症例のパラフィンおよび凍結切片組織より、マイクロディセクション法により腫瘍および周辺正常乳腺組織の核酸を抽出した。real-time PCR法にて、mRNA量を測定した。5'-RACE法により5'非翻訳領域exon、およびその発現パターンの解析を行った。遺伝子コード領域のSSCPによる変異スクリーンをした。combined bisulfite-restriction analysis(COBRA)法によりプロモーター領域のメチル化を検索した。成績:正常乳腺部との比較が可能な18例中、8例(44%)では10倍〜25倍腫瘍部mRNAの減弱、3例(17%)では5〜10倍の減弱をみた。全体として腫瘍部(33例)では正常部(18例)に比べて有意にmRNAが減弱していた(normalized value 4.49vs.17.68;p=0.0001)。しかし、6q,16q,17P,18q LOHとmRNA減弱には相関はなかった。SSCP法にて正常部にもみられる塩基配列のgermline polymorphismを複数検出したが、腫瘍部での体細胞変異は検出されなかった。5'非翻訳領域に複数のalternative splicing exonsを認めたが、multiplex PCRでは組織や腫瘍での特異的なパターンは認められず、正常乳腺および他組織でも類似のsplicing Patternを認めた。4つのalternative 1^<st> exonsの存在するCpG islandにつき、メチル化の有無を検索したところ、CpG islandの5'側にわずかのメチル化を腫瘍部のみならず、正常乳腺、正常組織、リンパ球にも認めた。すなわち、メチル化はHIV-EP2の腫瘍特異的発現抑制に関与しないと考えられた。結論:HIV-EP2遺伝子発現の減弱が乳癌では高頻度であり、乳癌発癌に関与する重要な遺伝子の1つである可能性が示唆された。しかし、同遺伝子の発現異常は遺伝子変異やメチル化によるのはなく、他の因子との相互作用などを介しておこることが想定された。

研究成果

(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Arakawa A, Eujii H, et al.: "Loss of heterozygosity in the clonal evolution with genetic progression and divergence in spindle cell carcinoma of gallbladder."Hum Pathol. in press. (2004)
[文献書誌] Matsumoto T, Fujii H, et al.: "Loss of heterozygosity analysis demonstrates monoclonal evolution with frequent genetic progression and divergence in esophageal carcinosarcoma."Hum Pathol. in press.
[文献書誌] Fujii H, Shimoda T, et al.: "Genetic evolution of alpha fetoprotein producing gastric cancer."J Clin Pathol. 56. 942-949 (2003)
[文献書誌] 藤井博昭他: "表面型大腸腫瘍の遺伝子解析"胃と腸. 38巻・8号. 1108-1188 (2003)
[文献書誌] Fujii, H, et al.: "Mucinous cancers have fewer genomic alterations than more common classes of breast cancer."Breast Cancer Res Treat. 76. 255-260 (2002)
[文献書誌] Fujii, H, et al.: "Loss of heterozygosity in the clonal evolution of flat colorectal neoplasms."J Pathol. 197. 298-306 (2002)
[文献書誌] 分担執筆藤井博昭, 他: "卵巣腫瘍病理アトラスより分担執筆、[広汎性浮腫]「多嚢胞性卵巣症候群」"文光堂(印刷中). (2004)

2003 年度 実績報告書

乳癌におけるHIV-EP2遺伝子異常の解析

研究代表者

藤井 博昭 順天堂大学, 医学部, 講師 (50296836)

研究成果

[文献書誌] Arakawa A, Eujii H, et al.: "Loss of heterozygosity in the clonal evolution with genetic progression and divergence in spindle cell carcinoma of gallbladder."Hum Pathol. in press. (2004)

[文献書誌] Matsumoto T, Fujii H, et al.: "Loss of heterozygosity analysis demonstrates monoclonal evolution with frequent genetic progression and divergence in esophageal carcinosarcoma."Hum Pathol. in press.

[文献書誌] Fujii H, Shimoda T, et al.: "Genetic evolution of alpha fetoprotein producing gastric cancer."J Clin Pathol. 56. 942-949 (2003)

[文献書誌] 藤井博昭 他: "表面型大腸腫瘍の遺伝子解析"胃と腸. 38巻・8号. 1108-1188 (2003)

[文献書誌] Fujii, H, et al.: "Mucinous cancers have fewer genomic alterations than more common classes of breast cancer."Breast Cancer Res Treat. 76. 255-260 (2002)

[文献書誌] Fujii, H, et al.: "Loss of heterozygosity in the clonal evolution of flat colorectal neoplasms."J Pathol. 197. 298-306 (2002)

[文献書誌] 分担執筆 藤井博昭, 他: "卵巣腫瘍病理アトラスより分担執筆、[広汎性浮腫]「多嚢胞性卵巣症候群」"文光堂(印刷中). (2004)

2003 年度実績報告書

藤井博昭順天堂大学, 医学部, 講師 (50296836)

[文献書誌] 藤井博昭他: "表面型大腸腫瘍の遺伝子解析"胃と腸. 38巻・8号. 1108-1188 (2003)

[文献書誌] 分担執筆藤井博昭, 他: "卵巣腫瘍病理アトラスより分担執筆、[広汎性浮腫]「多嚢胞性卵巣症候群」"文光堂(印刷中). (2004)